敏感的新試驗(yàn)檢測(cè)單個(gè)肝細(xì)胞和血清中的乙型肝炎感染
慢性乙型肝炎病毒(HBV)可發(fā)展為肝硬化和肝細(xì)胞癌(HCC)。發(fā)表在“分子診斷學(xué)雜志”上的一項(xiàng)研究描述了一種新的HBV檢測(cè)方法,該檢測(cè)方法優(yōu)于目前使用的方法,因?yàn)樗軌驒z測(cè)血清,單細(xì)胞和保存組織樣本中的閉合環(huán)狀DNA(cccDNA)。該測(cè)定可用于在較早階段診斷HCC以更有效地管理治療。
“HCC的發(fā)展與HBV密切相關(guān)。近年來(lái),針對(duì)cccDNA的幾種新的抗病毒策略已經(jīng)建立,以提高HBV清除率。為cccDNA檢測(cè)提供準(zhǔn)確,靈敏的方法具有重要的臨床意義。更多患有慢性HBV的患者將接受精確治療以預(yù)防或延遲HCC的發(fā)生,患者的HCC可在早期診斷,“首席研究員劉松梅博士解釋,中南基因診斷中心主任武漢大學(xué)醫(yī)院,武漢,中國(guó)。
新的測(cè)定法使用液滴數(shù)字PCR(ddPCR),它對(duì)于檢測(cè)病毒等微量分子非常靈敏和準(zhǔn)確。通過將ddPCR與PCR相結(jié)合,研究人員能夠檢測(cè)血清,單細(xì)胞和福爾馬林固定,石蠟包埋的腫瘤問題中的cccDNA。Southern印跡,目前被認(rèn)為是用于此目的的金標(biāo)準(zhǔn),并且其他測(cè)定具有重要限制,例如在檢測(cè)低拷貝數(shù)cccDNA時(shí)比ddPCR靈敏度低。其他方法需要通過肝臟活組織檢查獲得肝臟組織。“與肝活檢相比,血清可以無(wú)創(chuàng)獲得,廣泛用于臨床診斷目的,并具有均一的cccDNA分布。該檢測(cè)也提高了cccDNA的檢出限,”劉博士說。
ddPCR可用于鑒定哪些患者可能攜帶肝細(xì)胞癌。研究人員發(fā)現(xiàn),68例HCC患者中近90%為cccDNA陽(yáng)性,而79例非HCC患者為53%。與非HCC患者相比,HCC患者的血清cccDNA拷貝數(shù)更高。結(jié)合分析血清cccDNA和HBV-DNA鑒別HCC患者與非HCC患者。“這表明cccDNA是HCC的危險(xiǎn)因素,”劉博士說。
研究人員還能夠確認(rèn)血清cccDNA與肝臟樣本中測(cè)量的cccDNA水平正相關(guān)。“血清cccDNA確實(shí)是比肝內(nèi)cccDNA更好,更有用的診斷標(biāo)記,”劉博士說。最近,已發(fā)現(xiàn)幾種靶向cccDNA的新抗病毒策略可改善HBV清除率。因此,為cccDNA檢測(cè)提供準(zhǔn)確,靈敏的方法對(duì)于早期診斷和HCC預(yù)測(cè),靶向治療和評(píng)估治療效果具有重要的臨床意義。
在隨附的評(píng)論中,加拿大艾伯塔省埃德蒙頓大學(xué)實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)與病理學(xué)系的醫(yī)學(xué)博士,博士觀察到,“ 血清 cccDNA和HBV-DNA的定量是區(qū)分HCC患者的有效方法。非HCC患者的敏感性為74.5%,特異性為93.7%。這是一項(xiàng)重要發(fā)現(xiàn),可以早期診斷HCC,并以無(wú)創(chuàng)方式更準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)慢性HBV進(jìn)展。
據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì),全球有2.57億人感染了HBV,2015年HBV導(dǎo)致887,000人死亡,主要原因是肝臟并發(fā)癥。慢性HBV感染可以用替諾福韋或恩替卡韋等藥物治療。2015年,只有9%的HBV感染者知道自己被感染。
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