研究人員9月17日在“ 細胞報道 ”雜志上表示，接種一種埃博拉病毒，該病毒在一種名為VP35的蛋白質(zhì)??中具有突變，不會引起疾病并引發(fā)猴子的保護。研究結(jié)果表明，VP35的免疫逃避功能是一種潛在的藥物靶點，如果采取預(yù)防措施以防止逆轉(zhuǎn)為毒力，將來有可能開發(fā)減毒埃博拉病毒疫苗。

“這不是下一個埃博拉病毒疫苗，但該研究確實表明，有可能產(chǎn)生埃博拉病毒，這些病毒可以在細胞培養(yǎng)中生長并誘導強烈的免疫反應(yīng)，但會降低科學家的風險，”共同高級研究作者克里斯托弗說。佐治亞州立大學的巴斯勒。“這種突變病毒可能有助于安全地研究許多埃博拉病毒的功能。”

埃博拉病毒病是人類罕見但嚴重的致命疾病。直到2013年底，埃博拉病毒主要在中非造成零星和孤立的爆發(fā)。但是，影響超過28,000人的2013-2016流行病導致11,000多人死亡，并且病例從西非傳播到歐洲和美國。隨后在剛果民主共和國爆發(fā)的疫情進一步突出了解導致埃博拉病毒毒力的因素的重要性。

目前，尚未證實可以中和病毒的許可治療，但正在開發(fā)一系列治療方法。用于預(yù)防埃博拉病毒的疫苗也正在開發(fā)中，并已用于幫助控制幾內(nèi)亞和剛果民主共和國爆發(fā)的疫情。“目前大多數(shù)埃博拉候選疫苗僅表達一種病毒蛋白，即糖蛋白，但感染后存活的患者會對其他病毒蛋白產(chǎn)生強大的T細胞反應(yīng)，”Basler說。“這表明表達所有病毒蛋白的候選疫苗可能會引發(fā)更廣泛的，可能更有效的免疫反應(yīng)。”

在這項新研究中，Basler與德克薩斯大學醫(yī)學分院的Thomas Geisbert，加州大學歐文分校的Ilhem Messaoudi和明尼蘇達州羅切斯特市梅奧診所的Hideki Ebihara合作開發(fā)了一種表達全部的突變病毒。埃博拉病毒基因并具有實際埃博拉病毒顆粒的結(jié)構(gòu)。他們在VP35蛋白中產(chǎn)生了具有三個突變的病毒，其在逃避宿主免疫應(yīng)答中起重要作用。

具體而言，已知VP35抑制稱為I型干擾素的免疫系統(tǒng)蛋白的產(chǎn)生并抑制樹突細胞的成熟，所述樹突細胞將抗原呈遞給T細胞并充當先天免疫系統(tǒng)和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)之間的信使。“我們想確定VP35的這些功能如何影響埃博拉病毒病并在最能反映人類疾病的動物模型中寄主免疫反應(yīng)，”巴斯勒說。

先前的一項研究表明，用VP35-突變體埃博拉病毒感染可以保護豚鼠免受隨后用豚鼠適應(yīng)的埃博拉病毒的攻擊。但一般而言，與非人類靈長類動物模型相比，嚙齒類動物模型更容易受到抗病毒或疫苗方法的挑戰(zhàn)，后者易受引起人類疾病的相同埃博拉病毒株的影響。“我們之前的研究也沒有仔細評估對VP35-突變埃博拉病毒的免疫反應(yīng)，正如我們在研究中所做的那樣，”巴斯勒說。

為了測試他們的突變病毒是否會保護非人靈長類動物免受埃博拉感染，研究人員用它來接種三只食蟹猴 - 動物模型，作為評估埃博拉病毒毒力的金標準。用突變病毒感染激活抗原呈遞和先天免疫途徑，并引起增殖記憶T細胞和B細胞的頻率增加和抗體的產(chǎn)生。

28天后，研究人員用致死劑量的未經(jīng)修飾的埃博拉病毒攻擊了猴子。兩只猴子活了下來，沒有任何疾病跡象，但有一只猴子在九天后死亡。為了誘導更具保護性的反應(yīng)，研究人員用更高劑量的突變病毒接種了五只獼猴。疫苗接種導致三只猴子患上輕度疾病。這次，所有動物在以比未修飾的埃博拉病毒的標準100%致死攻擊劑量高300倍的劑量進行攻擊后存活，沒有可檢測的臨床體征。但大多數(shù)猴子表現(xiàn)出暫時的血液學變化，如血小板計數(shù)低或白細胞數(shù)量低。

“這些數(shù)據(jù)表明，VP35是一種關(guān)鍵的埃博拉病毒免疫逃逸因子，可以提供對埃博拉病毒控制免疫機制的見解，”巴斯勒說。“我們證明VP35抑制干擾素反應(yīng)是埃博拉病毒引起疾病的關(guān)鍵要求，VP35功能不僅影響先天的抗病毒防御，還影響適應(yīng)性免疫反應(yīng)。因為它對毒力至關(guān)重要，VP35的干擾素抑制功能是潛在的藥物目標。“

即使突變的埃博拉病毒高度減毒并且可以免疫非人靈長類動物，它在細胞培養(yǎng)物中表現(xiàn)出令人驚訝的強大復(fù)制。“這種特征組合使得突變埃博拉病毒可能適用于研究，而不會受到生物安全4級遏制所帶來的挑戰(zhàn)性限制，這種遏制用于最危險的微生物，”Basler說。

作者說，突變病毒還不適合作為疫苗，因為它首先必須克服監(jiān)管障礙，并確保多種不同的減毒突變可以防止病毒恢復(fù)并變得毒性。在未來的研究中，研究人員計劃研究是否可以使用類似的方法來減弱相關(guān)病毒。他們還有興趣發(fā)現(xiàn)其他突變，這些突變?nèi)匀辉试S病毒復(fù)制，同時防止病毒引起疾病。