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      使用CRISPR技術(shù)首次開發(fā)抗結(jié)核病的奶牛
      
			
      
				2019-01-05 09:18:12
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      據(jù)開放獲取期刊Genome Biology發(fā)表的最新研究報告，CRISPR / Cas9基因編輯技術(shù)首次成功用于成功生產(chǎn)對牛結(jié)核病具有更高抗性的活牛。來自中國陜西西北農(nóng)林科技大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院的研究人員使用CRISPR基因編輯技術(shù)的修改版本將一個新基因插入到?；蚪M中，沒有檢測到對動物遺傳的目標(biāo)效應(yīng)(a使用CRISPR創(chuàng)建轉(zhuǎn)基因動物時的常見問題。
      

      使用CRISPR技術(shù)首次開發(fā)抗結(jié)核病的奶牛
      

      該研究的主要作者張勇博士說：“我們使用一種名為CRISPR / Cas9n的新型CRISPR系統(tǒng)成功地將一種名為NRAMP1的結(jié)核抗性基因插入到?；蚪M中。然后我們能夠成功地開發(fā)出來。奶牛對結(jié)核病的抵抗力增強(qiáng)。重要的是，我們的方法對母牛遺傳沒有產(chǎn)生任何脫靶效應(yīng)，這意味著我們采用的CRISPR技術(shù)可能更適合用有目的操作的遺傳學(xué)生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因家畜。“
      

      近年來，CRISPR技術(shù)已經(jīng)在實驗室中廣泛使用，因為它是修改遺傳密碼的準(zhǔn)確且相對容易的方法。然而，有時遺傳密碼的無意改變作為脫靶效應(yīng)發(fā)生，因此找到減少這些的方法是基因組學(xué)研究的優(yōu)先事項。
      

      張博士解釋說：“當(dāng)你想在哺乳動物基因組中插入一個新基因時，難以找到插入基因的基因組中的最佳位置。你必須通過基因組搜尋，尋找你認(rèn)為會有的區(qū)域?qū)︵徑钠渌虻挠绊懽钚　Ｎ覀儾捎眉?xì)致和方法學(xué)的方法來確定最適合基因插入的區(qū)域，我們發(fā)現(xiàn)它對?；蚪M沒有可檢測的脫靶效應(yīng)“。
      

      研究人員使用CRISPR / Cas9n技術(shù)將NRAMP1基因插入牛胎兒成纖維細(xì)胞基因組中 - 這是一種來自雌性奶牛的細(xì)胞。然后在稱為體細(xì)胞核移植的過程中將這些細(xì)胞用作供體細(xì)胞，其中攜帶新基因的供體細(xì)胞的細(xì)胞核被插入來自雌性母牛的卵細(xì)胞(稱為卵子)中。Ova在實驗室中被培育成胚胎，然后轉(zhuǎn)移到母牛中進(jìn)行正常的妊娠周期。還使用標(biāo)準(zhǔn)CRISPR / Cas9技術(shù)進(jìn)行實驗作為比較。
      

      使用CRISPR插入新基因的總共11只小牛能夠評估對結(jié)核病的抗性和任何脫靶遺傳效應(yīng)。對小牛的遺傳分析表明，NRAMP1已經(jīng)成功地整合到所有小牛的目標(biāo)區(qū)域的遺傳密碼中。使用新的CRISPR / Cas9n技術(shù)插入基因的小牛中沒有一個具有任何可檢測的脫靶效應(yīng)，而所有帶有插入先前使用的CRISPR / Cas9技術(shù)的基因的小牛都有。
      

      當(dāng)小牛暴露于牛分枝桿菌，導(dǎo)致牛結(jié)核病細(xì)菌，研究人員發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)基因動物顯示由血液樣本中的感染標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)記物測定的細(xì)菌增加的阻力。他們還發(fā)現(xiàn)，在實驗室測試中，從小牛身上采集的白細(xì)胞對牛分枝桿菌暴露的抵抗力更強(qiáng)。
      

      張博士說：“我們的研究首次證明了CRISP / Cas9n系統(tǒng)可以用來制造沒有可檢測的脫靶效應(yīng)的轉(zhuǎn)基因家畜。我們的工作導(dǎo)致在牛基因組中發(fā)現(xiàn)了一個有用的位置，可以針對性利用這種基因編輯技術(shù)成功插入有利于農(nóng)業(yè)牲畜的新基因。“
      
			

			
        
      
			
      
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