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      從細菌細胞中分離質(zhì)粒DNA的自動化
      
			
      
				2019-07-10 08:47:48
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      從細菌中分離質(zhì)粒DNA是一種重要的分子生物學方法，用于產(chǎn)生用于優(yōu)選下游反應的模板DNA。質(zhì)粒分離方法是基本的; 然而，高通量質(zhì)粒DNA提取一直具有挑戰(zhàn)性，存在諸如低產(chǎn)量和基因組DNA(gDNA)污染的問題。
      

      從細菌細胞中分離質(zhì)粒DNA的自動化
      

      一種自動化，高通量，基于多孔的質(zhì)粒提取技術(shù)，其產(chǎn)量適合下游應用且不含gDNA，將大大有利于高通量實驗室，其中質(zhì)粒提取經(jīng)常成為瓶頸。
      

      96孔二氧化硅過濾板質(zhì)粒提取試劑盒可在市場上買到。在這些方法中，收獲細菌細胞并通過堿裂解裂解，消除細胞碎片，然后通過結(jié)合二氧化硅膜收集提取的DNA。隨后在洗脫純化的DNA之前洗滌膜。
      

      在本文中，耶拿描述了在SynbiCITE倫敦DNA鑄造開發(fā)出一種技術(shù)，它使用CyBio ® FELIX移液平臺自動96孔，二氧化硅過濾板基于質(zhì)粒DNA提取協(xié)議。
      

      使用的CyBio ® FELIX移液平臺(圖1)使96個樣品，以在同一時間進行處理，在約1.5小時，用通用性同時處理大量的板。緊湊的平臺最大限度地減少了實驗室中自動質(zhì)粒分離系統(tǒng)所需的工作臺空間，并且與臺式離心機和機械臂一起，可以實現(xiàn)完全自動化的質(zhì)粒提取系統(tǒng)。使用該技術(shù)，從細菌培養(yǎng)物中分離出平均產(chǎn)量為65ng /μL的質(zhì)粒DNA，樣品之間的變異性較低(±7.7ng /μLSD)和50μL的洗脫體積。質(zhì)粒DNA樣品也具有高質(zhì)量，適用于下游應用，如轉(zhuǎn)化或測序。
      
			

			
        
      
			
      
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