在哺乳動(dòng)物精子細(xì)胞的干燥保存方面取得了進(jìn)展
北卡羅來納大學(xué)夏洛特分校和史密森尼保護(hù)生物學(xué)研究所的研究小組在11月出版的Theriogenology雜志上發(fā)表的一篇論文中宣布,首次使用快速微波脫水方法成功干燥和補(bǔ)液家貓精子。
該論文的作者,來自北卡羅來納大學(xué)夏洛特分校的Jennifer Patrick和Gloria Elliott以及來自SCBI的Pierre Comizzoli表明,再水化的精子具有最小的DNA損傷并且是可行的 - 它們能夠在體外產(chǎn)生胚胎。由于該組先前已成功生產(chǎn)出可存活的脫水貓卵,因此該發(fā)現(xiàn)顯示了在干燥狀態(tài)下保存貓生殖細(xì)胞的可能性。
通過脫水成功保存貓精子遠(yuǎn)非神秘的成就,是解決野生貓科動(dòng)物生殖生物學(xué)中涉及的關(guān)鍵問題的潛在重要步驟。
許多生物學(xué)家和環(huán)境科學(xué)家認(rèn)為,生物圈目前處于“第六次滅絕”的中間,可能最終導(dǎo)致地球上物種數(shù)量的大幅減少和大規(guī)模生態(tài)系統(tǒng)的崩潰。存在很大的風(fēng)險(xiǎn),在不久的將來,對(duì)于地球生物多樣性至關(guān)重要的物種可能會(huì)滅絕或遺傳多樣性減少,以至于野生種群不可行。
如果有更多的皮蛋和精子“庫”,科學(xué)可能能夠迅速而成功地改善小動(dòng)物種群的狀況。科學(xué)家可以簡單地使用生殖材料儲(chǔ)存,以穩(wěn)定的干燥形式保存,重新水合它們并創(chuàng)造一群可存活的胚胎。
為什么干生殖細(xì)胞?保留精子,卵子和胚胎供以后使用的想法并不新鮮,但通常優(yōu)選的保存技術(shù)是將這些材料冷凍。冷凍保存是一種用于保存生殖細(xì)胞和胚胎的成熟技術(shù),但考慮到未來的不確定性,這種方法存在問題。在冰點(diǎn)溫度下儲(chǔ)存需要持續(xù)的能源供應(yīng),昂貴的技術(shù)和設(shè)施以及復(fù)雜的維護(hù)操作 - 所有困難且昂貴的事情需要長時(shí)間持續(xù)維持,特別是在偶爾的不利條件下。
大自然提出了另一種可能更強(qiáng)大的解決方案:通過脫水進(jìn)行細(xì)胞淤滯。植物,真菌和細(xì)菌通常這樣做,將它們的遺傳物質(zhì)放在孢子,孢囊,花粉和種子中,使其保持短時(shí)間 - 并且有時(shí)候,更長的時(shí)間尺度 - 并允許它在遠(yuǎn)距離運(yùn)輸同樣。
生活在惡劣沙漠和其他極端環(huán)境中的一些動(dòng)物 - 例如鹽水蝦和緩動(dòng)劑(“水熊”) - 也開發(fā)了將其生物學(xué)置于脫水停滯狀態(tài)的能力,有時(shí)長期使用。他們通過在細(xì)胞中產(chǎn)生和積累高濃度的二糖(如海藻糖)來實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo),這取代了脫水過程中失去的水分并固化成玻璃 - 一種非常高粘度的液體,可以阻止化學(xué)活性并固定酶 - 環(huán)境溫度冷凍細(xì)胞結(jié)構(gòu)和活性,琥珀冷凍的昆蟲的分子水平版本。
“當(dāng)你考慮長期保存有機(jī)體時(shí),你并不關(guān)心電氣中斷。洪水和其他天氣事件可能需要在脅迫下重新安置樣品,”Elliott指出。“冷凍樣品不易運(yùn)輸,而如果你的樣品是干燥的包裝 - 就像干果或你在架子上的任何干貨 - 你可以把你的收藏品放在一個(gè)袋子里然后走出門。這就是概念 - 不僅要保持低儲(chǔ)存成本,而且要使標(biāo)本易于運(yùn)輸,便于標(biāo)本的共用或重新安置。“
Elliott研究小組正在研究的保存方法包括將細(xì)胞懸浮在稀釋的海藻糖溶液中,然后通過溫和的微波輔助加熱過程去除水來濃縮它,以便形成海藻糖玻璃,在室溫下固定生物分子,類似于冷凍。
以前使用冷凍干燥技術(shù)將生殖細(xì)胞用海藻糖進(jìn)行類似的干燥保存,但是微波輔助方法更快并且可以允許更廣泛地使用該技術(shù)。
“這使我們能夠?qū)⑦@些保存技術(shù)納入一些低資源環(huán)境 - 第三世界國家,如發(fā)展中國家,”Elliott說。“如果你考慮用于生物多樣性研究的標(biāo)本 - 那些國家并沒有為這種收集而建立,這種保存方法開辟了這種可能性。”
這一發(fā)現(xiàn)還擴(kuò)大了哺乳動(dòng)物物種的范圍,這些物種的生殖細(xì)胞可以成功地進(jìn)行干燥保存。以前的實(shí)驗(yàn)已成功地在大鼠和小鼠中干燥保存了精子和卵細(xì)胞,但嚙齒動(dòng)物生殖細(xì)胞的生物學(xué)與其他哺乳動(dòng)物(包括貓和人)的生物學(xué)顯著不同。在嚙齒動(dòng)物中,精子細(xì)胞相對(duì)簡單并且主要僅包含雄性遺傳物質(zhì),而在貓和人類中它還包含中心體,細(xì)胞分裂所必需的細(xì)胞結(jié)構(gòu)和胚胎的成功發(fā)育。由于中心體對(duì)于繁殖是至關(guān)重要的,并且由于精子是小細(xì)胞結(jié)構(gòu),因此貓精子比嚙齒動(dòng)物精子更難以保存。
“這是貓精子第一次完成,貓精子比嚙齒動(dòng)物精子更接近人類精子,”Elliott指出。
“對(duì)老鼠進(jìn)行了大量的工作,但是大鼠不一定是中心體遺傳的良好模型,這可能會(huì)影響生育能力。這就是為什么我們認(rèn)為家貓模型對(duì)人類來說比嚙齒動(dòng)物更好,這就是發(fā)現(xiàn)很重要,“她說。
該團(tuán)隊(duì)再水合精子的繁殖成功率為6.5%,而新鮮精子的生殖成功率為15%,活力降低,但仍可用于保存目的。再水化的精子不能運(yùn)動(dòng),但這對(duì)于生產(chǎn)有活力的胚胎也不是至關(guān)重要的。
“當(dāng)我們?yōu)榱酥圃炫咛ザ稍锖蛢?chǔ)存樣品時(shí),我們不必?fù)碛型暾木?,因?yàn)槲覀儗⑹褂迷偎蠘悠愤M(jìn)行卵胞漿內(nèi)精子注射,”Elliott指出。“你不必有尾巴,你不必?fù)碛型暾木宇^ - 你基本上是注射關(guān)鍵的精子成分。精子頭部不一定要有很好的形狀,但你必須確保某些關(guān)鍵成分是完整的,包括中心體。“
雖然這一發(fā)現(xiàn)是一個(gè)概念驗(yàn)證,但在開發(fā)和證明該技術(shù)方面仍有許多工作要做。Elliott指出,目前實(shí)現(xiàn)的干燥程度是否足夠長,以便在沒有任何冷藏的情況下長期保存,以及是否可以進(jìn)一步干燥仍有待觀察。一旦這些條件得到優(yōu)化,就需要進(jìn)行測(cè)試以確保胚胎能夠成熟為健康的小貓。
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