兒童肺炎支原體感染三種實(shí)驗(yàn)診斷方法評價(jià)
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兒童肺炎支原體感染三種實(shí)驗(yàn)診斷方法評價(jià)
目的:探討兒童肺炎支原體感染的快速、簡便、有效的臨床實(shí)驗(yàn)室診斷方
法。方法:對2016年12月收集的200例臨床呼吸道感染患兒的咽拭子和靜脈血
樣本進(jìn)行肺炎支原體快速鑒定培養(yǎng)鏡檢、抗體檢測、抗原檢測及熒光定量PCR
(Polymerasechainreaction)分析。以快速培養(yǎng)鑒定鏡檢法為診斷肺炎支原體感
染金標(biāo)準(zhǔn),比較抗體檢測、抗原檢測及熒光定量PCR三種診斷方法的靈敏度、
特異度和Youden指數(shù)(正確診斷指數(shù))。結(jié)果:抗體檢測的靈敏度、特異度和
Youden指數(shù)分別為76.3%、77.9%、54.2%;抗原檢測為37.7%、89.5%、27.2%;
熒光定量PCR為93.0%、96.5%、89.5%。熒光定量PCR法的靈敏度、特異度和
Youden指數(shù)均高于抗體檢測和抗原檢測法(P<0.05),三者Youden指數(shù)兩兩比
較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論:熒光定量PCR具有較高的靈敏度、
特異度和Youden指數(shù),可以在未來替代快速鑒定培養(yǎng)鏡檢、抗體檢測和抗原檢
測法,作為臨床診斷兒童肺炎支原體感染的快速、簡便而有效的實(shí)驗(yàn)室診斷方法。
肺炎支原體(Mycoplasmapneumoniae,MP)是一種大小介于細(xì)菌和病毒之
間,缺乏細(xì)胞壁,能利用人工培養(yǎng)基生長繁殖的原核細(xì)胞型微生物,是人類支原
體肺炎(niaepneumonia,MPP)的病原體。MP主要經(jīng)飛沫傳播,潛
伏期2~3周,易感人主要為兒童和青少年[1-3]。國內(nèi)外多項(xiàng)研究表明,MP
的感染發(fā)病率從0.6%~47%不等,占兒童社區(qū)獲得性肺炎(Community-acquired
pneumonia,CAP)病原體的70%左右。隨著大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物的廣泛應(yīng)用,
其耐藥性有所增加,甚至出現(xiàn)了耐藥株。有效而靈敏的實(shí)驗(yàn)室診斷方法是診斷
MP感染的主要依據(jù)。目前,國內(nèi)大多醫(yī)院對MP感染的診斷,依舊停留在典型
的臨床感染癥狀結(jié)合血常規(guī)及MP抗體檢測或MP培養(yǎng)進(jìn)行診斷的水平。近年來,
熒光定量PCR(FluorescencdquantitativePCR,F(xiàn)Q-PCR)和抗原檢測診斷MP
感染雖已在臨床科研中少量使用,但大多醫(yī)院并未廣泛應(yīng)用[4-6]。在國外,PCR
基因診斷已作為臨床診斷的一種常用手段,以FQ-PCR為主。本研究采用MP快
速鑒定培養(yǎng)鏡檢、ELISA抗原檢測、被動凝集抗體檢測和FQ-PCR對2016年12
月收治的200例患兒進(jìn)行MP檢測,并以快速鑒定培養(yǎng)鏡檢為MP感染診斷的金
標(biāo)準(zhǔn)對抗體檢測、抗原檢測、FQ-PCR三種方法進(jìn)行方法學(xué)評價(jià),探討適合MP
感染早期快速、簡便而有效的診斷方法,現(xiàn)報(bào)道如下。
1材料與方法
1.1材料選取2016年12月就診于廈門市海滄醫(yī)院兒科的0~10歲未使用
抗菌藥物治療的CAP患兒,且在發(fā)病前三個月內(nèi)無呼吸道感染癥狀或血常規(guī)及
胸片等相關(guān)檢查不支持呼吸道感染。男100例,女100例,男∶女=1∶1,平均
年齡(4.87±1.21)歲。CAP診斷依據(jù)中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會2006年制定的診
斷和治療指南標(biāo)準(zhǔn)。
1.2儀器和試劑(1)ABI7500Fast實(shí)時熒光定量PCR系統(tǒng)(美國ABI公
司);(2)KDC-2046臺式低溫離心機(jī)(中國科大創(chuàng)新公司);(3)超低溫冰箱(日
本SANYO公司);(4)恒溫培養(yǎng)箱(德國賀利氏公司);(5)酶標(biāo)儀(美國BIO-RAD
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