研究人員使用一種新的流式細(xì)胞儀分析方法，設(shè)計(jì)出一種精確的方法，通過(guò)獨(dú)特的表面蛋白鑒定這些斑塊內(nèi)肥大細(xì)胞的特定亞群，并確定其激活機(jī)制。對(duì)這些動(dòng)脈粥樣硬化介質(zhì)的詳細(xì)了解為開(kāi)發(fā)人類動(dòng)脈粥樣硬化的新療法提供了重要機(jī)會(huì)。

發(fā)表在“ 細(xì)胞 ”雜志上的研究結(jié)果建立在之前的研究基礎(chǔ)上，該研究已經(jīng)確定了CD117 + FcεRI +斑塊內(nèi)肥大細(xì)胞亞型在斑塊發(fā)育，進(jìn)展和去穩(wěn)定中的特定作用。然而，它們的表征以前依賴于免疫組織化學(xué)，其僅通過(guò)少數(shù)表面標(biāo)記物表征細(xì)胞身份。

反過(guò)來(lái)，這限制了科學(xué)家精確表征肥大細(xì)胞的能力，包括其激活狀態(tài)的知識(shí)?，F(xiàn)在，Kritikou 等人開(kāi)發(fā)了基于流式細(xì)胞儀的方法。，已經(jīng)啟用了基于多標(biāo)記的特定肥大細(xì)胞類型的鑒定，以及它們?cè)谌藙?dòng)脈粥樣硬化斑塊中存在的激活狀態(tài)。

用免疫組織化學(xué)和流式細(xì)胞儀檢測(cè)

Kritikou教授及其團(tuán)隊(duì)開(kāi)發(fā)了一種新的流式細(xì)胞術(shù)方法，可以使用多種細(xì)胞標(biāo)記準(zhǔn)確確定肥大細(xì)胞的身份和活化狀態(tài)。Kritikou和她的團(tuán)隊(duì)一起描述了它們?cè)趧?dòng)脈粥樣硬化中的病理作用的激活機(jī)制。

已知肥大細(xì)胞活化主要通過(guò)與其高親和力受體FcεRI結(jié)合的抗體IgE的復(fù)合物發(fā)生。這使它們對(duì)抗原結(jié)合敏感。響應(yīng)于抗原，IgE-FcεRI復(fù)合物的交聯(lián)激活肥大細(xì)胞，最終釋放免疫應(yīng)答介質(zhì)。

Kritikous的數(shù)據(jù)證實(shí)，這種經(jīng)典模型提供了斑塊內(nèi)肥大細(xì)胞的主要激活機(jī)制。這些活化IgE片段的進(jìn)一步表征揭示了它們?cè)诎邏K組織中的位置，證實(shí)了循環(huán)IgE水平與災(zāi)難性心血管事件之間的相關(guān)性。他們的研究表明IgE是心血管事件發(fā)生的危險(xiǎn)因素，并提供了對(duì)過(guò)敏和動(dòng)脈粥樣硬化如何聯(lián)系的理解。

Kritikou和她的團(tuán)隊(duì)分析了從患者的股動(dòng)脈和頸動(dòng)脈部位收集的22個(gè)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊樣本。進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色以鑒定肥大細(xì)胞。隨后用針對(duì)特征性表面標(biāo)志物(CD45，CD117，F(xiàn)cεRI，CD117和IgE)的熒光標(biāo)記物以及在肥大細(xì)胞活化時(shí)釋放的顆粒介質(zhì)，類胰蛋白酶進(jìn)行抗體染色，用于流式細(xì)胞術(shù)分析。為了確定它們的活化狀態(tài)，研究人員篩選了共同存在的CD63，一種脫顆粒的介質(zhì)和一種脫顆粒的敏化劑IgE。

主要肥大細(xì)胞激活途徑 - 發(fā)掘基于IgE的治療靶點(diǎn)

流式細(xì)胞術(shù)的使用使得幾種標(biāo)記物能夠用于鑒定負(fù)責(zé)促進(jìn)患者的動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展的肥大細(xì)胞的特定亞群。進(jìn)一步的激活篩查顯示，來(lái)自兩個(gè)位置的肥大細(xì)胞均為兩種標(biāo)記物IgE和CD63陽(yáng)性，表明它們具有高度活化狀態(tài); 人類動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展的已知標(biāo)志物。

在沒(méi)有任何結(jié)合在表面的IgE片段的情況下，少部分斑塊內(nèi)肥大細(xì)胞被激活。這一發(fā)現(xiàn)使研究人員得出結(jié)論，CD117 + FcεRI +斑塊內(nèi)肥大細(xì)胞亞型激活的主要手段是通過(guò)IgE與FcεRI的結(jié)合而發(fā)生的，而少量細(xì)胞是獨(dú)立于IgE而激活的。正如Kritikou和研究人員所說(shuō)，這些研究結(jié)果通過(guò)針對(duì)人類動(dòng)脈粥樣硬化中IgE介導(dǎo)的作用為潛在的治療干預(yù)鋪平了道路。”，

希望進(jìn)一步研究肥大細(xì)胞功能，揭示新的激活途徑，這將為開(kāi)發(fā)抗動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展的新療法提供機(jī)會(huì)。