看著癌細胞接管
從歷史上看,量化DNA一直是了解細胞功能的有用工具,并量化細胞在細胞周期的哪個階段。計算存在的DNA的量通常通過將熒光團(在光激發(fā)下可以重新發(fā)光的熒光化學化合物)以特定的比例與細胞的DNA結合,并通過流式細胞術以高通量方式測量變化來進行(計算從大量細胞中改變DNA物質)。
雖然該方法允許研究細胞群的某些方面,但細胞群的動態(tài)變化(以及不同細胞群中的變量)不允許在個體水平上檢查細胞。此外,將細微且不穩(wěn)定的細胞群暴露于影響行為的毒素將導致對真實細胞內容和行為的不準確理解。
以前,通過結合高度特異性激光掃描細胞計數和熒光標記進行可視化研究。所使用的許多熒光團與活細胞(例如DAPI)不相容,因為它們不是膜可滲透的化學物質,并迫使研究人員通過化學方法固定細胞(因此在時間上凍結)。細胞可以貼上標簽。膜透性熒光團最近被設計用于可視化活染色體隨時間的移動,但很快就發(fā)現一些最常見的染料含有細胞毒素,這些細胞毒素引發(fā)DNA突變并觸發(fā)某些基因(如p53)被激活。另外,實驗所需的UV光暴露最終會導致DNA分裂,導致細胞周期停滯和細胞凋亡。
顯然,當試劑影響實驗結果時,不能使用前面提到的研究細胞行為(特別是不穩(wěn)定癌細胞的行為)的方法,因此需要新的方法。
亞利桑那大學癌癥中心的Gomes等人最近在細胞分部發(fā)表了一篇方法論文,他們試圖通過使用無毒程序在一段時間內測量活細胞中的DNA含量來彌合細胞可視化和未改變的細胞環(huán)境之間的差距。時間他們使用熒光團Hoechst 33342,一種活細胞DNA染料,可以透過細胞膜,結合DNA鏈的AT區(qū)域,并且在穩(wěn)定的環(huán)境中與活細胞相容(它不應該誘導細胞毒性作用,干擾細胞膜)研究細胞)。該方法還允許使用非3D成像,使科學家能夠更輕松,更快速地完成整個過程。
成像方法的這一突破為科學家提供了觀察癌細胞生長和變異的工具,其方式以前既麻煩又難以確認。它是探索多倍體細胞未解決的細胞分裂和增殖動力學的一種有吸引力的新技術,無需昂貴和復雜的3D成像,并且根據作者可以與任何化學計量的活細胞DNA染料一起使用。除癌癥研究外,這種成像方式為不同學科的研究人員提供了更好的學習和了解細胞行為和過程的能力。
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