CRISPR-Cas9系統(tǒng)的變異提供了編輯而不會(huì)削減兩條DNA鏈

來自日本多家機(jī)構(gòu)的研究人員開發(fā)了一種新方法來編輯基因，這種方法只涉及切割一條DNA而不是兩條DNA，正如CRISPR-Cas9的正常情況一樣。在他們發(fā)表在“ 科學(xué) ”雜志上的論文中，該團(tuán)隊(duì)描述了該技術(shù)以及為什么他們認(rèn)為這對(duì)某些應(yīng)用更好。

CRISPR-Cas9 基因編輯技術(shù)在過去幾年中成為頭條新聞，因?yàn)樗试S相對(duì)容易的DNA替換。它涉及將細(xì)菌與模板一起引入細(xì)胞中 - 細(xì)菌在特定位置切割DNA鏈，然后細(xì)胞使用模板進(jìn)行修復(fù) - 結(jié)果是已經(jīng)編輯以適應(yīng)特定需要的螺旋。但有時(shí)出現(xiàn)問題，因?yàn)槠渌?xì)胞機(jī)制也會(huì)參與，這可能導(dǎo)致不必要的刪除或插入。為了解決這個(gè)問題，至少在一部分，研究人員已經(jīng)用脫氨酶從一個(gè)(即能夠從化合物中除去氨基的酶)組合Cas9 海七鰓鰻，允許單鏈編輯。

研究人員采用了兩種途徑來實(shí)現(xiàn)相同的目標(biāo)，一種使用核酸酶死亡版本的Cas9，這使得它根本無法切割鏈，另一種使用能夠創(chuàng)造他們所描述的切口剪切的切口酶Cas9一條鏈。在兩種方法中，得到的Cas9與活化誘導(dǎo)的胞苷脫氨酶融合，這允許僅切割一條鏈然后進(jìn)行其取代工作 - 所有這些都不需要模板。經(jīng)過大量測(cè)試后，該團(tuán)隊(duì)得出結(jié)論，使用切口酶Cas9方法更有效。他們還報(bào)告說，他們也能夠同時(shí)對(duì)兩個(gè)基因進(jìn)行更改，并且通過添加另一種酶，他們能夠提高該技術(shù)的效率。

該團(tuán)隊(duì)在酵母樣本上測(cè)試了該技術(shù)(因?yàn)樗鼪]有自己的內(nèi)部基因改變系統(tǒng))，并發(fā)現(xiàn)它導(dǎo)致的附帶突變比常規(guī)CRISPR-Cas9少。他們認(rèn)為該技術(shù)可能對(duì)基因編輯研究有用，因?yàn)槠渌?xì)菌和細(xì)胞類型特別容易發(fā)生突變。

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