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      解析基因打靶原理  構(gòu)建重組基因載體
      
			
      
				2020-08-26 09:26:11
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			  來源：中華網(wǎng)
			
      
		
      
				
		
      
			
      說起基因打靶，想必大家都很陌生，因為基因打靶對于我們來說都不是很熟悉的。那么，下面小編收集了一些關(guān)于基因打靶的資料來跟大家了解下。
      

      

      基因靶向是一種利用同源重組方法改變生物體某一內(nèi)源基因的遺傳學(xué)技術(shù)。這一技術(shù)可以用于刪除某一基因、去除外顯子或?qū)朦c突變，從而可以對此基因的功能進行研究。基因打靶的效果可以是持續(xù)的，也可以是條件化的。例如，條件可以是生物體發(fā)育或整個生命過程中的一個特定時刻，或?qū)⑿?yīng)限制在某一特定組織中?；虼虬械膬?yōu)點在于可以應(yīng)用于任何基因，無需考慮其大小和轉(zhuǎn)錄活性。
      

      “基因靶向”技術(shù)，通常被稱作基因敲除。是指對一個結(jié)構(gòu)已知但功能未知的基因，從分子水平上設(shè)計實驗，將該基因去除，或用其他相近基因取代，然后從整體上觀察實驗動物，推測相應(yīng)基因的功能。
      

      基因打靶技術(shù)是從20世紀(jì)80年代發(fā)展起來的，是建立在對同源重組不斷了解的基礎(chǔ)之上。首先是以酵母這種較為簡單的真核模式生物為基礎(chǔ)，來對相關(guān)技術(shù)進行研究。隨著外源DNA導(dǎo)入酵母細(xì)胞方法的建立、標(biāo)記基因有效選擇的利用、同源重組轉(zhuǎn)化子篩選系統(tǒng)的建立、載體同源序列DNA(靶標(biāo))雙鏈斷裂提高同源重組效率的利用，使得基因打靶技術(shù)逐漸成熟起來。而對于哺乳動物細(xì)胞，由于其基因組比酵母細(xì)胞要大且復(fù)雜，基因打靶的成功率很低。因此要將基因打靶技術(shù)應(yīng)用于哺乳動物，還需要新的策略。1989年，利用胚胎干細(xì)胞，美國科學(xué)家馬里奧·卡佩奇和奧利弗·史密斯與英國科學(xué)家馬丁·埃文斯，將基因打靶技術(shù)成功地應(yīng)用于小鼠;他們也因此獲得了2007年諾貝爾生理學(xué)與醫(yī)學(xué)獎。
      

      2013年3月，云南中科靈長類生物醫(yī)學(xué)重點實驗室、中科院昆明動物研究所、南京醫(yī)科大學(xué)、南京大學(xué)、同濟大學(xué)等多家單位合作，利用目前世界最新的基因組編輯技術(shù)CRISPR/Cas9和TALENs實現(xiàn)獼猴和食蟹猴兩個物種的靶向基因修飾，同年10月和11月分別獲得世界首例經(jīng)過CRISPR/Cas9基因靶向修飾及TALENs基因靶向修飾的兩只小猴。
      

      值得一提的是，對于不同的生物體，所使用的基因打靶的方法也不用。而此前基因打靶技術(shù)還被用于一些植物，特別是小立碗蘚的研究。
      
			

			
        
      
			
      
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