國內(nèi)種豬場豬支原體肺炎流行病學(xué)調(diào)研
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國內(nèi)種豬場豬支原體肺炎流行病學(xué)調(diào)研
豬支原體肺炎在我國廣泛流行,為查清該病在山西省流行情況,
對部分種豬場和散養(yǎng)戶進(jìn)行了流行病學(xué)調(diào)研,證實(shí)豬咳嗽、氣喘現(xiàn)
象較為普遍;對疑似病豬、死豬采集病料,用PCR試劑盒檢測豬肺炎
支原體病原陽性率為26%以上;對非免疫豬抽檢血樣,用ELISA試
劑盒檢測豬肺炎支原體血清抗體陽性率為36.7%以上。以上調(diào)研證明,
山西種豬場豬支原體肺炎感染較為嚴(yán)重,與臨床調(diào)查結(jié)果基本相符。
可能與山西晝夜溫差大,養(yǎng)豬戶只重視保溫、不重視通風(fēng),絕大多數(shù)
養(yǎng)豬戶不接種豬肺炎支原體疫苗有一定關(guān)系。為今后山西省防治該病
提供了重要依據(jù)。
豬支原體肺炎(MPS)是由豬肺炎支原體(MH)引起的豬的一種慢性、
接觸性呼吸道傳染病,以咳嗽、氣喘、生長緩慢為特征,在世界范圍
內(nèi)廣泛流行,主要通過鼻腔接觸和空氣傳播。病豬表現(xiàn)為咳嗽和氣喘,
肺部肉樣或肝樣病變?;加性摬〉穆圆∝i,易誘發(fā)其它呼吸道疾病,
增加病死率,并且該病一旦傳入豬,很難徹底清除。病豬日增重降
低約17.4%,飼料轉(zhuǎn)化率降低約14%。在德國漢堡召開的第18屆
IPVS(世界豬病大會)上發(fā)表的資料表明,豬肺炎支原體是豬呼吸道病
綜合征(PRDC)的主要病原體之一,陽性率達(dá)82.5%。山西晝夜溫差大,
環(huán)境污染嚴(yán)重,飼養(yǎng)條件不好,使該病成為常見病、多發(fā)病,嚴(yán)重危
害養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。本病是高發(fā)病低死亡,其防治不被養(yǎng)豬業(yè)者重視。
筆者于對豬支原體肺炎在山西省的流行情況進(jìn)行了流行病學(xué)調(diào)研,現(xiàn)
將結(jié)果總結(jié)如下。
1、材料與方法
1.1流行病學(xué)調(diào)查方法
筆者對太原、晉中、陽泉、長治、忻州、原平等地市10個飼養(yǎng)
100頭母豬以上規(guī)模的種豬場、飼養(yǎng)30頭母豬以下規(guī)模的散養(yǎng)戶、
門診病例及3個屠宰場進(jìn)行調(diào)研。調(diào)研內(nèi)容:沒有免疫過豬肺炎支原
體疫苗的豬是否有咳嗽、氣喘、生長速度降低癥狀及屠宰后肺部病
變,對疑似感染豬及屠宰時(shí)肺部有病變的豬采集病料檢測病原,對非
免疫豬采集血樣
檢測抗體,并做好詳細(xì)記錄。
1.2病原、抗體檢測材料及檢測方法
1.2.1檢測材料對有呼吸道癥狀的疑似感染豬肺炎支原體母豬、
仔豬、肥育豬每頭活體采血5mL,用鼻拭子采集呼吸道分泌物;對屠
宰場和門診病例肺部有病變的豬采集支氣管和有病變的肺部組織,用
咽拭子采集呼吸道分泌物,放-70℃冰箱保存?zhèn)溆谩Ψ敲庖哓i每頭
采血3-5mL。
1.2.2檢測試劑豬肺炎支原體PCR檢測試劑盒與豬肺炎支原體血
清抗體ELISA檢測試劑盒由北京索奧生物醫(yī)藥科技有限公司提供。
1.2.3實(shí)驗(yàn)儀器PCR儀、低溫高速冷凍離心機(jī)、電泳儀、紫外線
凝膠成像儀、酶標(biāo)儀、洗板機(jī)等。
1.2.4病原檢測方法按照豬肺炎支原體PCR檢測試劑盒的操作步
驟進(jìn)行:樣品處理(組織樣品處理、全血樣品處理、陽性對照處理、
陰性對照處理)DNA的提取PCR擴(kuò)增電泳凝膠成像拍照結(jié)果判定。紫
外線燈下觀察,在陽性對照出現(xiàn)187bp擴(kuò)增條帶、陰性對照無條帶
出現(xiàn)時(shí),實(shí)驗(yàn)結(jié)果成立。被檢樣品出現(xiàn)187bp擴(kuò)增條帶為豬肺炎支
原體陽性,否則為陰性。
1.2.5抗體檢測方法按照豬肺炎支原體血清抗體ELISA檢測試劑
盒操作步驟進(jìn)行:全血樣品處理稀釋血清加樣洗板加酶結(jié)合物洗板顯
終止酶標(biāo)儀判定。空白孔調(diào)零,在酶標(biāo)儀上測各孔的OD630值。若
樣品OD6300.42,判為陽性;若樣品OD6300.38,判為陰性;若樣品
0.38OD6300.42,判為可疑,建議重新檢測,若重復(fù)檢測結(jié)果仍在
0.38~0.42,判為陽性。
2、結(jié)果
2.1流行病學(xué)調(diào)研情況
2.1.1流行特點(diǎn)筆者調(diào)查發(fā)現(xiàn),該病一年四季均可發(fā)生,但寒冷、
氣候多變的季節(jié)多發(fā);塑料大棚飼養(yǎng)、10-35kg的仔豬多發(fā);飼養(yǎng)管
理不善、衛(wèi)生條件差、飼養(yǎng)密度大、通風(fēng)換氣不好的豬場多發(fā)。仔豬
感染后可發(fā)生死亡,肥育豬多為慢性或隱性。病原體隨豬咳嗽、噴嚏
及分泌物排出體外,主要通過呼吸道感染健康豬,該病可長期在豬
中流行。豬發(fā)病以慢性型為主,有呼吸道癥狀的豬占豬總數(shù)的
30%以上。
2.1.2臨床癥狀急性型表現(xiàn)突然發(fā)病,呼吸加快,張口喘氣,發(fā)
出拉風(fēng)箱似的喘鳴聲,口鼻流出帶泡沫的分泌物,一般體溫沒有變化。
慢性型表現(xiàn)體溫不高,咳嗽,次數(shù)逐漸增多,尤其在早晨活動后和采
食時(shí)連續(xù)咳嗽,咳嗽時(shí)站立不動、低頭、伸頸、弓背,直到把分泌物
咳出為止;嚴(yán)重的精神萎靡,采食量下降,行動無力,可視黏膜發(fā)紺,
呼吸困難,有明顯的腹
式呼吸,呼吸快而用力,張口喘氣,病豬消瘦、生長緩慢。如果
混合感染或繼發(fā)感染豬藍(lán)耳病、豬傳染性胸膜肺炎等,則體溫升高。
2.1.3病理變化尸體剖檢眼觀病變主要在肺部。急性病例肺高度
膨大,被膜緊張,幾乎充滿整個胸腔,有程度不同的水腫、氣腫,并
且為灰白、灰紅、橘紅;病變部位切面濕潤、致密、膨脹,擠壓時(shí)
小支氣管流出灰白帶泡沫的液體。慢性病例,兩側(cè)肺的心葉、尖葉、
中間葉呈對稱性的外觀似鮮肉樣、胰樣、蝦肉樣的病變,與健康組織
界限明顯,對稱性典型病
變豬占50%左右;從小支氣管可擠壓出灰白帶泡沫的漿液或混
濁黏稠的液體,肺門淋巴結(jié)、支氣管淋巴結(jié)和縱隔淋巴結(jié)腫大,呈灰
白,切面外翻濕潤。繼發(fā)感染鏈球菌病、副豬嗜血桿菌病時(shí)可見關(guān)
節(jié)炎、腦炎、心包炎、胸膜炎和腹膜炎等。繼發(fā)感染豬藍(lán)耳病時(shí)肺小
葉間質(zhì)增寬,呈明顯的彌漫性、間質(zhì)性肺炎。繼發(fā)感染豬傳染性胸膜
肺炎時(shí)可見化膿性肺炎。對3個屠宰場屠宰的2600頭豬的肺部進(jìn)行
肉眼觀察,有病變的豬為1196頭,占46%,其中有對稱性病變的豬
為813頭,占肺部有病變豬的68%,占總數(shù)的31.3%。
2.2豬肺炎支原體病原、抗體檢測結(jié)果
2.2.1病原檢測結(jié)果疑似病豬、死豬的血清、鼻咽拭子、肺組織
的豬肺炎支原體病原檢測結(jié)果見表1
表1豬肺炎支原體病原陽性率%
注:血清、鼻拭子基本上采自同一頭調(diào)查豬場和門診病例的疑似
病豬;鼻咽拭子以鼻拭子為主,咽拭子從活體中不易采集,是從病死
豬中采集的;野豬是從2個發(fā)生呼吸道病的野豬場的6頭病死豬體采
集的。
2.2.2血清抗體檢測結(jié)果未免疫豬肺炎支原體疫苗豬場的母豬、
仔豬(10-35kg)、肥育豬(35kg后)的豬肺炎支原體血清抗體檢測結(jié)
果見表2。
表2豬肺炎支原體血清抗體陽性率%
3小結(jié)與討論
(1)豬肺炎支原體病原、抗體檢測結(jié)果表明,山西種豬場豬支原
體肺炎感染較為嚴(yán)重,與臨床調(diào)查結(jié)果基本相符??赡芘c山西晝夜溫
差大,養(yǎng)豬戶只重視保溫、不重視通風(fēng),絕大多數(shù)養(yǎng)豬戶不接種豬肺
炎支原體疫苗有一定關(guān)系,為今后山西省防制該病提供了有力的依據(jù)。
(2)試驗(yàn)證明,即使豬感染了豬支原體肺炎,在血清中基本上
檢測不出其病原體,在鼻咽拭子中可以檢測出病原體,但沒有血清抗
體陽性率高,這可能與病料的采集時(shí)間(感染期后)有關(guān);有肺部病變
病料的病原陽性率比用鼻咽拭子采集的病料高出10個百分點(diǎn)。對非
免疫豬場,采用ELISA試劑盒檢測豬肺炎支原體血清抗體能夠較客觀
地反映豬的實(shí)際感染情況。因此,對免疫豬場采用鼻咽拭子活體采
集病料、病死豬采集肺部病變組織檢測病原體,對非免疫豬采血檢
測抗體,可作為診斷感染豬肺炎支原體的依據(jù)。
(3)豬肺炎支原體定植于上呼吸道纖毛,導(dǎo)致纖毛功能降低,不
能有效清除呼吸道中的碎片及侵入的病原菌,并且豬肺炎支原體和其
它細(xì)菌協(xié)同感染導(dǎo)致地方性肺炎的發(fā)生。因此豬經(jīng)常出現(xiàn)并發(fā)感染
或混合感染,給養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失,應(yīng)引起養(yǎng)豬戶的高度
重視,應(yīng)采取接種疫苗、改善飼養(yǎng)條件、加強(qiáng)飼養(yǎng)管理等綜合性防控
措施嚴(yán)防本病的發(fā)生。
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