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肺炎支原體IgM抗體檢測(cè)SOP

一、檢驗(yàn)?zāi)康?/p>

規(guī)范實(shí)驗(yàn)室人員操作，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

二、預(yù)期用途

該產(chǎn)品用于定性檢測(cè)血清、血漿或全血中的肺炎支原體IgM抗體。是引起社區(qū)獲得性

呼吸道感染的主要病原體之一，可以導(dǎo)致支氣管炎和非典型性肺炎。主要引起人非典型肺

炎、氣管炎及支氣管炎，多經(jīng)口和呼吸道等途徑傳播，多發(fā)于兒童和青年人。MP感染已占

小兒呼吸道疾病30%以上，且有增加趨勢(shì)。感染肺炎支原體后，能產(chǎn)生特異性IgM和

IgG抗體。IgM抗體出現(xiàn)早，一般在感染后1周出現(xiàn)，3~4周達(dá)高峰，以后逐漸降低。再

次感染或重復(fù)感染后，常在1-2周內(nèi)出現(xiàn)較高水平的IgG抗體。MP肺炎與一般呼吸道感染

和肺炎的臨床癥狀沒(méi)有明顯區(qū)別，MP感染早期診斷有利于MP肺炎的治療。血青學(xué)診斷法

是臨床常用的主要診斷方法之一，靈敏度和特異性適中，常用的主要有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

和凝集試驗(yàn)。

三、檢驗(yàn)原理

本產(chǎn)品以膠體金作為指示標(biāo)記，用膠體金標(biāo)記抗人IgM單抗，以基因工程技術(shù)表達(dá)肺

炎支原體P1蛋白抗原標(biāo)被硝酸纖維素膜，應(yīng)用“間接法”免疫層析技術(shù)原理，檢測(cè)的肺炎

支原體感染病人血清、血漿或全血中的肺炎支原體抗體IgM,在檢測(cè)過(guò)程中，若樣本中存在

肺炎支原體抗體gM,則肺炎支原體抗體1gM與樣本吸附墊中的膠體金一抗人IgM單抗結(jié)合

物形成復(fù)合物，復(fù)合物沿硝酸纖維素膜移動(dòng)到檢測(cè)區(qū)，與檢測(cè)線上包被的肺炎支原體P1蛋

白抗原結(jié)合，多余的未被結(jié)合的結(jié)合物繼續(xù)移動(dòng)到質(zhì)控區(qū)，與質(zhì)控線上包被的羊抗鼠IgG

抗體結(jié)合，反應(yīng)膜上出現(xiàn)1條紅的檢測(cè)線和1條紅的質(zhì)控線；若樣本中不存在肺炎支

原體抗體IgM,則膠體金一抗人IgM單抗結(jié)合物直接沿硝酸纖維素膜移動(dòng)到質(zhì)控區(qū)，與質(zhì)控

線上包被的羊抗鼠IgG抗體結(jié)合，僅形成一條紅的質(zhì)控線。

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四、主要組成成份

1、試劑盒組分

包括肺炎支原體1gM抗體檢測(cè)卡，樣品稀釋液。

1.1、檢測(cè)卡主要組分：包括金標(biāo)墊和硝酸纖維素檢測(cè)膜，金標(biāo)墊內(nèi)包被有膠體金

標(biāo)記的抗人IgM單克隆抗體；硝酸纖維素檢測(cè)膜的檢測(cè)線上包被有基因工程技術(shù)表達(dá)的肺

炎支原體P1蛋白抗原，質(zhì)控線上包被有羊抗鼠IgG抗體。

1.2、樣品稀釋液主要成分：PBS緩沖液。

2、每盒產(chǎn)品內(nèi)含肺炎支原體1gM抗體檢測(cè)卡，共25人份，單人份/袋均加干燥劑

單獨(dú)密封包裝；樣品稀釋液1瓶，7mL/瓶：

同種產(chǎn)品不同批號(hào)試劑盒的稀釋液在有效期內(nèi)可互換使用。

五、儲(chǔ)存條件及有效期

產(chǎn)品儲(chǔ)存應(yīng)在4℃~30℃條件下，通風(fēng)、避光、干燥處，禁止冷凍；有效期18個(gè)

月。生產(chǎn)日期和有效期見(jiàn)標(biāo)簽。

六、樣本要求

1、本試劑盒僅適用于血清、血漿或全血樣本。

2、血漿樣本適用的抗凝劑為肝素或EDTA.

3、樣本應(yīng)收集于潔凈、干燥的容器中。

4、嚴(yán)重溶血的樣本必須重新采集血樣。

5、樣本收集后應(yīng)盡可能馬上使用，不能在室溫下長(zhǎng)時(shí)間存放，血清、血漿或全血

樣本可在2-8℃冷范存放7天，血清或血漿長(zhǎng)期保存需冷凍于-20攝氏度，冷藏或冷凍

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樣本應(yīng)在檢測(cè)前恢復(fù)到室溫并充分混勻，樣本切忌反復(fù)凍使用。

七、檢測(cè)方法

1、樣本收集

血清血漿或者全血做檢測(cè)樣本，可直接使用，若收集臨床分離新鮮血清做檢測(cè)樣本，

分離新鮮血清樣本要在1h內(nèi)完成檢測(cè)，超過(guò)1h需2-8℃保存，2-8℃保存時(shí)間不超過(guò)7

天。

2、檢測(cè)方法

將包裝袋沿缺口處撕開，取出檢測(cè)卡，平放，在檢測(cè)卡右端的加樣孔中加10nL的樣本，

再加100uL樣品稀釋液，3-5分鐘后可觀察檢測(cè)卡中部金視窗的結(jié)果，20分鐘內(nèi)判讀結(jié)果

有效。

八、檢驗(yàn)結(jié)果的解釋

陽(yáng)性：在觀察窗C、T處各出現(xiàn)一條紅線。

陰性：僅在觀察窗C處出現(xiàn)一條紅線。

無(wú)效：在觀察窗C處無(wú)紅線出現(xiàn)，表明試驗(yàn)失敗或試劑失效。在任何情況下，

應(yīng)重新檢測(cè)，如果問(wèn)題仍然存在，應(yīng)停止使用該批號(hào)產(chǎn)品，并與當(dāng)?shù)毓?yīng)商聯(lián)系。

九、檢驗(yàn)方法的局限性

1、本檢測(cè)卡僅適用于新鮮血清、血漿或全血樣本。

2、由于受試劑盒檢測(cè)最低檢出量的限制，如樣本中抗體濃度過(guò)低，可能得出不正

確的陰性結(jié)果。

3、肺炎支原體1gM抗體檢測(cè)試劑盒(膠體金法)只能定性檢測(cè)肺炎支原體抗體IgM

的存在，不能確定樣本中抗體的具體含量。

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4、本產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果僅供臨床參考，不應(yīng)作為臨床診治的唯一依據(jù)，對(duì)患者的臨床

管理應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室檢查(尤其是病原學(xué)檢測(cè))、治療反應(yīng)及流行病

學(xué)等信息綜合考慮。

5、感染初期，肺炎支原體1gM抗體未產(chǎn)生或滴度很低會(huì)導(dǎo)致陰性結(jié)果，如懷疑有

病原體感染，應(yīng)提示患者在7-14天內(nèi)復(fù)查，抽取第二份樣本，并和第一份樣本在同條件下

同時(shí)檢測(cè)，以確定是否有初次感染的血清轉(zhuǎn)化或肺炎支原體IgG抗體滴度4倍升高。

6、由于孕婦的實(shí)驗(yàn)室檢查不能可靠地鑒定胎兒患病的風(fēng)險(xiǎn)，故不建議采用本試劑

對(duì)無(wú)癥狀的母體感染進(jìn)行篩查，不得將本試劑的檢測(cè)結(jié)果單獨(dú)作為終止妊娠的依據(jù)。

7、免疫功能受損或接受免疫抑制治療治療的患者，如人類免疫缺陷病毒（HIV）感染

者或器官移植后接受免疫抑制治療的患者，其血清IgM抗體檢測(cè)的參考值有限，可能會(huì)導(dǎo)

致錯(cuò)誤的醫(yī)學(xué)解釋。

8、在近幾個(gè)月內(nèi)接受過(guò)輸血或其他血液制品治療的人，對(duì)其陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果的分析應(yīng)

慎重。

9、肺炎支原體IgM抗體不僅出現(xiàn)于初次感染，當(dāng)二次感染和復(fù)發(fā)感染時(shí)也可能出

現(xiàn)。

10、當(dāng)疾病的流行程度降低時(shí)陽(yáng)性預(yù)測(cè)值降低，對(duì)低危人陽(yáng)性結(jié)果的解釋應(yīng)當(dāng)

謹(jǐn)慎，本試劑對(duì)適用人的性別、年齡及地域特征沒(méi)有特殊要求。

十、產(chǎn)品性能指標(biāo)

1、符合率：同批號(hào)的試劑盒檢測(cè)10份符合率陽(yáng)性參考品及10份符合率陰性參考

品，陽(yáng)性符合率及陰性符合率均不低于100%.

2、精密度：企業(yè)中強(qiáng)陽(yáng)性、弱陽(yáng)性參考品檢測(cè)結(jié)果均為陽(yáng)性，顯均一，企業(yè)陰

性參考品檢測(cè)結(jié)果均為陰性。

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3、最低檢出量：同批號(hào)的試劑盒檢查1:8倍稀釋的最低檢出量陽(yáng)性參考品，檢測(cè)

結(jié)果為陽(yáng)性，顯均一。

4、交叉反應(yīng)：未發(fā)現(xiàn)本品與腺病毒IgM抗體、肺炎衣原體IgM抗體、柯薩奇B病

毒IgM抗體、呼吸道合胞病毒IgM抗體、弓形蟲IgM抗體、乙型肝炎核心抗體、丙型肝炎

抗體和巨細(xì)胞病毒IgM抗體陽(yáng)性血清有交叉反應(yīng)。

5、干擾試驗(yàn)：血紅蛋白濃度為4g/L的溶血、甘油三酯濃度為5mmol/L的脂血、

膽紅素濃度為140umol/L的黃疸、類風(fēng)濕因子濃度為200IU/mL的類風(fēng)濕、濃度為26g/L的

高濃度非特異性IgG抗體、濃度為11g/L的高濃度非特異性IgM抗體，或低于上述濃度，

對(duì)檢測(cè)結(jié)果無(wú)干擾。本試劑盒不受抗核抗體、抗線粒體抗體的干擾。

6、HO0K效應(yīng)：陽(yáng)性血清1:8倍稀釋后檢測(cè)為陽(yáng)性，原倍血清檢測(cè)亦為陽(yáng)性，未出

現(xiàn)鉤狀效應(yīng)。

7、IgM類類風(fēng)濕因子和高效價(jià)肺炎支原體IgG抗體不對(duì)本品的檢測(cè)產(chǎn)生干擾。

8、藥物干擾：左氧氟沙星不對(duì)本品檢測(cè)產(chǎn)生影響。

十一、注意事項(xiàng)

1、本品如在冰箱中儲(chǔ)存，取出后應(yīng)充分復(fù)溫(至室溫)再打開包裝使用。

2、使用前不能浸濕測(cè)試板或觸摸反應(yīng)膜。

3、包裝袋內(nèi)有干燥劑，不得內(nèi)服。

4、產(chǎn)品為一次性使用，僅用于體外診斷，用過(guò)的檢測(cè)卡以及采樣、加排過(guò)程中使

用的一次性器皿應(yīng)按處理醫(yī)療垃圾的相關(guān)規(guī)定進(jìn)行處理。

5、如出現(xiàn)陰性結(jié)果，但癥狀仍然存在者應(yīng)采用其他診斷方法。

6、檢驗(yàn)一旦開始操作，應(yīng)按操作步驟連線進(jìn)行，直至結(jié)束。

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7、試劑盒應(yīng)貯存在4℃-30℃通風(fēng)、干爆處，禁止冷凍。

十二、參考文獻(xiàn)

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