第17卷第9期

2015年9月

中國當代兒科雜志

ChinJContempPediatr

Vol.17No.9

Sep.2015

doi:10.7499/.1008-8830.2015.09.010

論著?臨床研究

呼吸道吸出物

MP-DNA

檢測對兒童肺炎

支原體肺炎診斷的臨床意義

顧文婧1　張新星1　陳正榮1　嚴永東1　朱燦紅1　黃莉1　王美娟1　邵雪君2　季偉1

（蘇州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院1.呼吸科；2.檢驗科，江蘇蘇州　215003）

［摘要］　目的　探討鼻咽抽吸物（NPA）和肺泡灌洗液（BALF）中肺炎支原體（MP）

-

DNA

檢測對兒

童MP肺炎（MPP）診斷的意義。方法　收集164例MPP患兒入院24h內(nèi)的NPA及BALF，熒光定量PCR法檢

測MP

-

DNA；同時在入院

24h內(nèi)及治療7~10d病情好轉(zhuǎn)時采集所有患兒靜脈血，ELISA法檢測血清特異性MP

-

IgM。結(jié)果　164例患兒NPA的MP

-

DNA陽性檢出率為51.8%，

低于雙份血清MP

-

IgM陽性檢出率（63.4%）（

P

=0.044），

兩者檢出一致性中等（

Kappa

=0.618，

P

<0.01）；BALF的MP

-

DNA陽性檢出率為71.3%，與雙份血清MP

-

IgM陽

性檢出率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（

P

>0.05），兩者檢出一致性好（

Kappa

=0.793，

P

<0.01）；NPA的MP

-

DNA陽

性檢出率低于BALF（

P

<0.01），兩者檢出一致性中等（

Kappa

=0.529，

P

<0.01）。BALF中MP的中位拷貝數(shù)高

于NPA（

P

<0.01）。NPA和BALFMP

-

DNA的檢出率均隨病程延長有下降趨勢（

P

<0.05），病程~2周及~4周

患兒BALFMP

-

DNA檢出率高于NPA（

P

<0.05）。結(jié)論　BALF中MP

-

DNA

檢出敏感性高，對臨床早期診斷MPP

具有重要意義；而

NPAMP

-

DNA檢測可能會引起漏診。［中國當代兒科雜志，2015，17（9）：937-941］

［關(guān)鍵詞］　肺炎支原體肺炎；支氣管肺泡灌洗液；鼻咽抽吸物；兒童

ClinicalsignificanceofMP-DNAfromendotrachealaspiratesindiagnosisof

Mycoplasmapneumoniaepneumoniainchildren

GUWen-Jing,ZHANGXin-Xing,CHENZheng-Rong,YANYong-Dong,ZHUCan-Hong,HUANGLi,WANGMei-

Juan,SHAOXue-Jun,mentofRespiratoryDisease,Children'sHospitalAf?liatedtoSoochowUniversity,

Suzhou,Jiangsu215003,China(JiW,Email:szdxjiwei@)

Abstract:ObjectiveTocomparethedetectionratesofMycoplasmapneumoniae(MP)fromnasopharyngeal

aspirates(NPA)andbronchoalveolarlavagefluid(BALF)sAtotalof164

BALFofthesechildrenwerecollectedwithin24hours

ofadmission,andMP-DNAwasdetectedby?bloodsamplesofallthesechildren

werecollectedwithin24hoursofadmissionandondays7-10oftreatment,andserumMP-IgMwasdetectedusing

sThepositiverateofMP-DNAinNAPofthe164caseswas51.8%,whichwaslowerthan63.4%as

thedetectionrateofMP-IgMinserum(P=0.044),andthetwodetectionratesweremoderatelycistentwitheachother

(Kappa=0.618,P<0.01).ThepositiverateofMPinBALFwas71.3%,whichwasnotsigni?cantlydifferentwiththatof

MP-IgMinserum(P>0.05),andthedetectionrateswerewellcistent(Kappa=0.793,P<0.01).ThedetectionrateofMP

inNPAwaslowerthanthatinBALF(P<0.01),withmoderatecistencybetweentwoofthem(Kappa=0.529,P<0.01).

ThemedianMPcopynumberinBALFwassigni?cantlyhigherthanthatinNPA(P<0.01).TheMPdetectionratesinNPA

andBALFweresigni?cantlydifferentamongdifferentcoursesofdisease(P<0.05).Asthecourseofdiseaseextended,the

MPdetectionratesinbothNPAandBALFshowedadecliningtrend;childrenwithMPpneumoniaof1-2weeks'duration

and2-4weeks'durationhadahigherMP-DNAdetectionrateinBALFthaninNPA(P<0.05).ConclusiMP-DNA

canceforearlydiagnosisofMPpneumonia,whileNPAMP-DNAtests

inBALFhasahighsensitivity,withagreatsigni

?

mayleadtoamisseddiagnosis.[ChinJContempPediatr,2015,17(9):937-941]

Keywords:Mycoplasmapneumoniaepneumonia;Bronchoalveolarlavage?uid;Nasopharyngealaspirates;Child

［收稿日期］2015-01-21；［接受日期］2015-03-13

［基金項目］江蘇省社會發(fā)展項目（BE2012652）。

［作者簡介］顧文婧，女，碩士研究生。

［通信作者］季偉，女，主任醫(yī)師，教授。

?937?

第17卷第9期

2015年9月

中國當代兒科雜志

ChinJContempPediatr

Vol.17No.9

Sep.2015

肺炎支原體肺炎（Mycoplasmapneumoniae

pneumonia,MPP）是最為常見的兒童社區(qū)獲得性肺

炎。肺炎支原體（Mycoplasmapneumoniae,MP）是

兒童呼吸道感染最常見的病原之一[1]。近年來，

MP在兒童呼吸道感染中有逐年上升趨勢，每3~

5年可發(fā)生一次大流行[2]。MP培養(yǎng)是診斷MP感

染的金標準，但由于MP培養(yǎng)要求高且耗時，因此

臨床上多采用血清特異性抗體檢測或PCR檢測MP

感染[3]。MP

-

IgM陽性是診斷MP感染的主要實驗

室指標，但MP

-

IgM一般在發(fā)病1周后才能檢出，

且在免疫系統(tǒng)缺陷或發(fā)育不完善的患兒中假陰性

率高；熒光定量PCR檢測方法具有靈敏度高，特

異性強和檢測時間短等優(yōu)點，對MPP的早期診斷

起到了很大的作用，與普通PCR相比，減少了擴

增產(chǎn)物污染的機會，提高了檢測特異性[4]。目前臨

床普遍采用鼻咽抽吸物（nasopharyngealaspirates,

NPA）行MP

-

DNA檢測，其結(jié)果目前尚存在爭議。

近年來隨著支氣管鏡術(shù)在兒科的逐漸開展，經(jīng)支

氣管鏡行支氣管肺泡灌洗，從支氣管肺泡灌洗液

（bronchoalveolarlavagefluid,BALF）中獲得病原微

生物檢測結(jié)果，被認為具有直接、可靠、敏感的

優(yōu)點，對指導(dǎo)MPP患兒的診療價值備受關(guān)注[5]。

目前對NPA與BALF的MP

-

DNAPCR檢測

在MPP中的診斷價值的研究資料尚少。本研究

對2013年4月至2014年3月間在我院呼吸科住

院治療的164例肺炎患兒，在采集NPA的同時因

診治需要采集BALF，并將NPA和BALF行MP

-

DNAPCR檢測，并將檢測結(jié)果與血清學(xué)比較，求

證NPA和BALF的MP

-

DNA檢測對MPP診療的臨

床意義。

55例，~2周有51例，~4周有26例，病程>4周

有32例。

研究對象納入標準：（1）年齡在1個月至

14歲；（2）因呼吸道感染入院，臨床疾病診斷標

準依據(jù)《諸福棠實用兒科學(xué)》第7版[6]；（3）入院

24h內(nèi)及出院前因診治需要行血清MP

-

IgM檢測；

（4）經(jīng)門診治療或住院治療5~7d，臨床癥狀、

體征或/和影像學(xué)檢查無明顯改善或反復(fù)咳喘時間

較長而行電子支氣管鏡檢查及肺泡灌洗術(shù)治療的

患兒；（5）住院期間同一天采集NPA和BALF。

本研究獲得醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準；每位

患兒采集NPA及BALF標本時均告知家屬，并簽

署知情同意書。

1.2　標本采集

入院24h內(nèi)用一次性吸痰管送入患兒鼻腔

7~8cm，

利用

負壓吸取NPA1~2mL；BALF收

集方法為在電子支氣管鏡到達病變局部時進行灌

洗，灌洗部位都選擇病變重的肺段，0.9%氯化鈉

溶液（體重≤20kg者每次灌洗量1mL/kg，體重

>20kg者每次灌洗量2mL/kg）進行支氣管肺泡灌

洗，以負壓10~15mmHg進行抽吸以獲取BALF。

入院24h內(nèi)及治療7~10d病情好轉(zhuǎn)時采集所有患

兒靜脈血。

1.3　實時熒光定量PCR法檢測NPA及BALF

中

MP

-

DNA

取NPA

及BALF標本，經(jīng)震蕩、離心、去上

清，再加入裂解液提取

DNA，進行PCR擴增，引

物及探針來自廣州中山大學(xué)達安基因股份有限公

司。探針結(jié)合序列位于上游引物與下游引物之間。

在特異性雜交熒光探針的5'端結(jié)合熒光發(fā)光基團，

在3'端結(jié)合熒光吸收基團。將樣品（標本和質(zhì)控品）

上清液2

μ

L或陽性定量參考品直接加入反應(yīng)管中，

12000r/min離心5min，放人儀器樣品槽。PCR反

應(yīng)條件：93℃預(yù)變性2min；93℃變性45s，55℃

退火60s，10個循環(huán)；93℃變性30s，55℃退

火45s，30個循環(huán)。熒光采集點設(shè)置為55℃退火

45s階段。熒光定量PCR的結(jié)果以Ct值顯示，反

應(yīng)結(jié)束電腦自動分析結(jié)果。結(jié)果判定：（1）Ct值

≥39，實驗結(jié)果為陰性；（2）Ct值<38，實驗結(jié)

果為陽性；（3）Ct值在38~<39時，進行重復(fù)測

定。儀器為美國BIO

-

RAD公司的Icycleriq熒光定

量PCR儀。

938?

1　資料與方法

1.1　研究對象

選取2013年4月至2014年3

月期間于我院

呼吸科就診的164例MPP患兒為研究對象，其

中男98例（59.8%），女66例（40.2%）；年齡

2個月至14歲，平均年齡4.6±2.0歲，其中<1歲

24例（14.6%），1歲~34例（20.7%），3歲~

63例（38.4%），≥7歲43例（26.2%）；支氣管

肺炎60例（36.6%），大葉性肺炎104例（63.4%）。

164例患兒中，發(fā)病至入院采集標本病程≤1周有

?

第17卷第9期

2015年9月

中國當代兒科雜志

ChinJContempPediatr

Vol.17No.9

Sep.2015

1.4　ELISA法檢測血清MP

-

IgM

試劑盒購自德國歐蒙醫(yī)學(xué)實驗診斷股份有限

公司。取患兒外周血1~2mL，常規(guī)離心，取血

清

10

μ

L，用樣本緩沖液1

:

101稀釋，充分混勻后

加入抗原包被的微孔板上的微量孔中，同樣把標

準血清和對照血清各100

μ

L加入微量孔中，室溫

（18~25℃）下溫育30min；清洗緩沖液洗滌3遍

后加入100

μ

L過氧化物酶標記的羊抗人IgM抗體，

室溫溫育30min；倒掉微孔板內(nèi)液體，洗滌3遍

后，滴加100

μ

L原/底物液至每一微孔，避光

溫育15min。以與加原/底物液相同的速度和順

序滴加100

μ

L終止液至每一微孔。終止后酶標儀

450nm波長處測吸光度D值。計算樣本和標準品

D值的比值，通過比值半定量判斷MP

-

IgM結(jié)果。

比值>1.1為陽性，0.8~1.1為可疑，<0.8為陰性。

對出院時復(fù)查的血清MP

-

IgM較入院時第一次檢測

的血清MP

-

IgM值增高1.5倍或以上診斷為MP急

性感染

。

1.5　統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件包對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)

分析，計量資料以中位數(shù)（范圍）表示，兩組間

比較采用Wilcoxon秩和檢驗。計數(shù)資料采用百分

率（%）表示，各組陽性率比較采用卡方檢驗或

Fisher確切概率法。一致性比較采用四格表

χ2檢驗，

以血清MP抗體檢測結(jié)果為標準計算

Kappa

值。

Kappa

值越大說明一致性越好，

Kappa

值>0.75表

示兩者一致性好；

Kappa

值在0.40~0.75間表示

一致性中等；

Kappa

值<0.40表示一致性較差。

P

<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

[7]

表1　雙份血清MP

-

IgM及NPAMP

-

DNA檢出結(jié)果比較

[

n

=164，

n

（%）]

NPAMP

-

DNA

陽性

陰性

合計

雙份血清MP

-

IgM

陽性

79(48.2)

25(15.2)

104(63.4)

陰性

6(3.7)

54(32.9)

60(36.6)

合計

85(51.8)

79(48.2)

164(100)

注：NPA：鼻咽抽吸物；MP：肺炎支原體。

雙份血清MP

-

IgM和BALFMP

-

DNA同時陽性

103例（62.8%），兩者檢出一致性好（

Kappa

=0.793，

P

<0.001），兩者陽性檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義

（

χ2=2.344，

P

>0.05）。見表2。

表2　雙份血清MP

-

IgM及BALFMP

-

DNA檢出結(jié)果比較

[

n

=164，

n

（%）]

BALFMP

-

DNA

陽性

陰性

合計

雙份血清MP

-

IgM

陽性

103(62.8)

1(0.6)

104(63.4)

陰性

14(8.5)

46(28.1)

60(36.6)

合計

117(71.3)

47(28.7)

164(100)

注：BALF：支氣管肺泡灌洗液；MP：肺炎支原體。

NPA和BALFMP

-

DNA同時陽性82例

（50.0%），兩者檢出一致性中等（

Kappa

=0.529，

P

<0.001），兩者檢出陽性率差異有統(tǒng)計學(xué)意義

（

χ2=54.500，

P

<0.001）。見表3。

表3　NPAMP

-

DNA及BALFMP

-

DNA檢出結(jié)果比較

[

n

=164，

n

（%）]

BALFMP

-

DNA

陽性

陰性

合計

NPAMP

-

DNA

陽性

82(50.0)

3(1.8)

85(51.8)

陰性

35(21.4)

44(26.8)

79(48.2)

合計

117(71.3)

47(28.7)

164(100)

2　結(jié)果

2.1　MP檢出情況

164例患兒中，雙份血清MP

-

IgM

檢出陽性

104例（63.4%），NPA的MP

-

DNA檢出陽性85

例（51.8%），BALF的MP

-

DNA檢出陽性117例

（71.3%）。其中，三者均為陽性的78例（47.6%），

三者均為陰性的34例（20.7%）。

雙份血清MP

-

IgM和NPAMP

-

DNA同時陽性

79例（48.2%），兩者檢出一致性中等（

Kappa

=0.618，

P

<0.001），兩者陽性檢出率差異有統(tǒng)計學(xué)意義

（

χ2=4.507，

P

=0.044）。見表1。

?

注：NPA：鼻咽抽吸物；BALF：支氣管肺泡灌洗液；MP：肺

炎支原體。

2.2　NPAMP

-

DNA與BALFMP

-

DNA拷貝數(shù)比較

164例肺炎患兒中，NPA的MP

-

DNA

中位拷貝

數(shù)為1.27×105（0~2.50×107），BALF的MP

-

DNA

中位拷貝數(shù)為3.29×106（3.29×103~2.50×107），兩

者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（

Z

=3.155，

P

=0.002）。

939?

第17卷第9期

2015年9月

中國當代兒科雜志

ChinJContempPediatr

Vol.17No.9

Sep.2015

2.3　不同病程患兒NPA和BALF中MP檢出率

比較

NPA和BALFMP

-

DNA

的檢出率在不同病程

患兒中差異有統(tǒng)計學(xué)意義（

P

<0.05），且均隨著病

程延長有下降趨勢；其中NPAMP

-

DNA檢出率在

病程2周以上的患兒中較病程在2周及以下的患

兒明顯下降（

χ2=31.100，

P

<0.001）。

病程≤1周和>4周患兒中，BALF中MP

-

DNA的檢出率和NPA中MP

-

DNA的檢出率比較

差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均

P

>0.05）；病程在~2周

和~4周患兒中，BALF中MP

-

DNA的檢出率均高

于NPA中MP

-

DNA的檢出率（均

P

<0.05）。見表4。

表4　不同病程患兒NPA和BALFMP

-

DNA陽性檢出比較

[

n

（%）]

標本

NPA

BALF

χ

值

P

值

2

免疫功能影響[1]。

研究結(jié)果顯示，BALF中MP檢出陽性率

為71.3%，雙份血清MP特異性抗體陽性率為

63.4%，均高于NPA中MP陽性率51.8%。以雙份

血清MP特異性抗體滴度4倍升高作為金標準，雙

份血清MP檢出陽性率明顯高于NPA中MP的檢

出率，兩者的一致性中等。既往有研究報道雙份

血清MP特異性抗體陽性率均高于NPAMP

-

DNA

PCR，與此研究結(jié)果相一致[2

-

3]。因而，若臨床上

單純以NPA

-

MP檢測結(jié)果作為參考，可能會引起

MPP的漏診，從而不利于MPP的及時治療。而

與雙份血清抗體檢出率相比，BALF中MP檢出率

與之相比并無明顯差異，且兩者的一致性較好。

但BALFMP

-

DNAPCR可早期診斷MP感染，便于

MPP患兒早期治療，因而優(yōu)于雙份血清MP特異

性抗體的檢測，臨床上檢測BALF中MP非常有必

要[13]。而對于MP

-

DNAPCR，以BALF為標本與

NPA相比，兩者檢出一致性中等，但BALF中檢

出率明顯高于NPA，這與Xu等[14]研究結(jié)果有所

不同，但與研究組既往研究結(jié)果相一致，可能原

因是存在于上呼吸道中的MP較下呼吸道中MP更

容易清除，但具體原因有待于研究進一步證實。

本研究中BALF中的MP拷貝數(shù)較NPA中更

高，可能原因為下呼吸道的局部微環(huán)境更適合MP

的生存，也支持自身防御系統(tǒng)或抗MP藥物更容易

將上呼吸道中MP清除。既往已有研究證實高拷貝

數(shù)的MP是支持MP感染臨床診斷的依據(jù)[4,15]，因

而BALF中高拷貝數(shù)的MP更支持MP感染。

研究顯示NPA中病程在≤1周、~2周、~4周、

超過4周MP的檢出率分別為69%、67%、35%、

12%，隨著病程的推移，MP檢出率逐漸下降。黃

淑媛等[12]研究認為MP

-

DNA在發(fā)病初期的陽性率

較高，隨著治療和病情的轉(zhuǎn)歸，陽性率迅速下降

轉(zhuǎn)陰，表明MP

-

DNA可以直觀地反映MP在體內(nèi)感

染和復(fù)制的情況，與此研究結(jié)果一致。Kashyap等

[16]

≤1周~2周

(

n

=55)(

n

=51)

38(69)

45(82)

2.405

>0.05

34(67)

44(86)

5.449

0.034

~4周

(

n

=26)

9(35)

18(69)

6.240

0.025

>4周

(

n

=32)

4(12)

10(31)

3.291

>0.05

χ2值

33.972

-

-

P

值

<0.001

-

-

33.729<0.001

注：NPA：鼻咽抽吸物；BALF：支氣管肺泡灌洗液。

3　討論

MP是一種介于病毒與細菌之間，可以獨立存

活的微生物，其通過飛沫進行傳播，是引起兒童

呼吸道感染的重要的病原體之一

。MPP可占兒

童肺炎的1.3%~50%不等[8]，尤其以嬰幼兒以及學(xué)

齡期兒童多見[3]。MPP臨床表現(xiàn)多樣，且病情輕

重不同，具有病程長、易反復(fù)等特點，且容易發(fā)

生肺外并發(fā)癥，對其進行早期診斷有著重要的臨

床意義[9

-

10]

[3]

。傳統(tǒng)的分離培養(yǎng)以及抗體檢測是實驗

室診斷MPP的金標準[11]，但MP培養(yǎng)條件要求嚴

格，且陽性率低；而特異性抗體受患兒免疫功能

影響，且高峰出現(xiàn)較晚，如果第一份血清采集過早，

可能導(dǎo)致假陰性，不利于早期診斷[12]。PCR診斷

研究也認為MP

-

DNA動態(tài)變化，可以為臨床動

技術(shù)自1985年問世以來，已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)及生

物學(xué)的各個領(lǐng)域。非MP感染患者咽部極少帶有該

病原體，為該檢測的準確性提供了保證。熒光定

量PCR具有檢測快、靈敏度高等優(yōu)點，更能夠?qū)?/p>

病原體進行準確定量，有助于臨床早期診斷，彌

補了MP

-

IgM高峰出現(xiàn)時間晚等不足，且不受患兒

?

態(tài)觀察治療效果提供依據(jù)。在病程≤1周患兒的

BALF中MP檢出率與NPA檢出率比較差異無統(tǒng)計

學(xué)意義，而病程~2周與~4周的患兒BALF中MP

檢出率仍高達86%、69%，BALF中MP檢出率均

明顯高于NPA，但當病程超過4周時，兩者檢出

率差異也并不明顯。提示在起病初期（≤1周），

940?

第17卷第9期

2015年9月

中國當代兒科雜志

ChinJContempPediatr

Vol.17No.9

Sep.2015

患兒機體自身防御系統(tǒng)或抗MP藥物尚未完全對

MP清除，因而BALF與NPA中MP檢出的敏感

性相同，而隨著時間的推移，患兒上呼吸道中MP

逐漸被清除，而下呼吸道中MP依然存在，因而

BALF中MP的檢出率要明顯高于NPA，范麗萍等

[17]

道肺炎支原體感染診斷中的應(yīng)用[J].臨床兒科雜志,2009,

27(7):625

-

628.

[4]

張曉波,陸愛珍,王立波,等.肺炎支原體熒光定量聚合酶

鏈反應(yīng)在肺炎支原體感染中的診斷評價[J].中華兒科雜志,

2008,46(6):442

-

445.

[5]

[6]

[7]

劉璽誠.努力發(fā)展和推廣兒科支氣管鏡術(shù)[J].臨床兒科雜志,

2009,27(1):7

-

11.

胡亞美,江載芳,主編.諸福棠實用兒科學(xué)[M].第7版,北

京人民衛(wèi)生版社,2002:1167

-

1175.

GuoQ,LiHY,ZhouYP,atiofradiological

featuresinMycoplasmapneumoniaepneumonia[J].ArchMed

Sci,2014,10(4):725-732.

[8]LiuFC,ChenPY,HuangF,iagnosisof

Mycoplasmapneumoniaeinfectioninchildrenbypolymerase

chainreaction[J].JMicrobiolImmunolInfect,2007,40(6):507-

512.

[9]

高炳杰,孫志榮,張玉芹,等.小兒喘息性疾病與肺炎支原

體感染關(guān)系的研究[J].中國當代兒科雜志,2001,3(3):325

-

326.

[10]AkihiroT,KousakuM,TakayukiT,prednisolone

pulsetherapyforrefractorymycoplasmapneumoniae

pneumoniainchildren[J].JInfect,2008,57(3):223-228.

[11]WaitesKB,BalishMF,ightsintothe

pathogenesisanddetectionofMycoplasmapneumoniae

infection[J].FutureMicrobiol,2008,3(6):635-648.

[12]

黃淑媛,覃川平,黎偉霞,等.MP

-

DNA、MP

-

IgM及MP

-

IgG

在兒童肺炎支原體感染中的動態(tài)變化[J].中國當代醫(yī)藥,

2014,21(4):95

-

97.

[13]

成云改,李淑嫻,李雪靜,等.肺炎支原體肺炎患兒肺泡灌

洗液病菌量與臨床特征相關(guān)性研究[J].中華兒科雜志,2013,

51(10):736

-

740.

[14]XuD,LiSX,ChenZM,ionofMycoplasma

pneumoniaeindifferentrespiratoryspecimens[J].EurJPediatr,

2011,170(7):851-858.

[15]

張永峰,王永芹.熒光定量PCR對兒童肺炎支原體感染早期

診斷和臨床意義[J].山東醫(yī)藥,2011,51(35):78

-

79.

[16]KashyapB,KumarS,SethiGR,isonofPCR,

culture&serologicaltestsforthediagnosisofMycoplasma

pneumoniaeincounityacquiredlowerrespiratorytract

infectiinchildren[J].IndianJMedRes,2008,128(2):134-

139.

[17]

范麗萍,孫惠泉,黃莉,等.兒童支原體肺炎肺泡灌洗液檢

測與臨床關(guān)系探討[J].臨床肺科雜志,2013,18(10):1755

-

1757.

（本文編輯：萬靜）

一項研究結(jié)果也證實在病程8~60d時BALF中

仍可檢出MP的存在，也進一步支持此次實驗研究

結(jié)果。當病程超過4周時，患兒上下呼吸道中MP

均逐漸被清除，因而BALF與NPA中MP檢出率

比較并無明顯差異。

研究結(jié)果顯示BALFMP

-

DNAPCR檢出率與

雙份血清MP特異性抗體滴度4倍升高相比，一致

性好，檢出率無明顯差異，但較雙份血清相比，

BALFMP

-

DNAPCR可早期診斷MP感染，較雙份

血清特異性抗體檢測具有優(yōu)勢。而NPAMP

-

DNA

PCR檢出率與雙份血清特異性抗體相比，一致性

中等，且低于雙份血清特異性抗體的檢出率，易

引起漏診。對于病程較長的患兒，以BALF為標本

行MP

-

DNAPCR檢測更具有優(yōu)勢。

雖然BALF較NPA的MP

-

DNAPCR檢出率高，

但臨床上BALF獲取較NPA困難，故NPA

-

MP檢

測仍然是診斷MPP的重要循證醫(yī)學(xué)依據(jù)；BALF

MP

-

DNAPCR檢出率及拷貝數(shù)均明顯高于NPA，

故對于臨床上行支氣管鏡檢查的患兒，收集BALF

檢測MP非常有必要，尤其是NPA

-

MP及第一份血

清MP特異性抗體檢出陰性者，BALFMP

-

DNA檢

測可幫助臨床診治。

［參　考　文　獻］

[1]

[2]

朱中梁,馬娟,汪洪良.兩種方法檢測肺炎支原體的對比研

究[J].臨床肺科雜志,2013,18(5):886

-

888.

趙茹,黃莉,季偉.雙份血清MP抗體及痰MP

-

PCR檢測

在兒童肺炎支原體感染診斷中的價值[J].江蘇醫(yī)藥,2008,

34(12):1282

-

1283.

[3]

季偉,陳正榮,張愛麗,等.熒光PCR和定量ELISA在呼吸

?941?