誘導(dǎo)細(xì)胞融合允許在人類(lèi)致病性真菌煙曲霉中使用競(jìng)爭(zhēng)性適應(yīng)度分析
針對(duì)新型治療靶點(diǎn)的抗真菌藥物是治療侵襲性、慢性和過(guò)敏性曲霉菌感染所必需的。競(jìng)爭(zhēng)性適應(yīng)度分析技術(shù)已被用于許多細(xì)菌和酵母系統(tǒng)中,以識(shí)別藥物靶點(diǎn);然而,在絲狀真菌中類(lèi)似系統(tǒng)的發(fā)展是復(fù)雜的,因?yàn)樗鼈兘?jīng)歷細(xì)胞融合和異核。在此,我們證明在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)條件下熏蒸曲霉菌的細(xì)胞融合不像大多數(shù)子囊菌那樣以構(gòu)成為主,但可以由一系列細(xì)胞外應(yīng)激誘導(dǎo)。
利用這一知識(shí),我們開(kāi)發(fā)了一種無(wú)條碼的遺傳圖譜系統(tǒng),該系統(tǒng)可同時(shí)測(cè)定二倍體煙曲霉突變體的應(yīng)變適應(yīng)度。我們發(fā)現(xiàn),在伊曲康唑和brefeldin A存在的情況下,雜合cyp51A和arf2無(wú)突變體的適應(yīng)度分別降低,而一個(gè)雜合atp17無(wú)突變體對(duì)brefeldin A具有抗性。
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