新方法可監(jiān)控CAR T細(xì)胞
2019年2月20日消息,—嵌合抗原受體-T(Chimeric Antigen Receptor-T,CAR-T)細(xì)胞療法已經(jīng)在血液瘤病人身上產(chǎn)生了顯著的療效。但是這個(gè)領(lǐng)域存在的挑戰(zhàn)之一就是缺乏檢測(cè)免疫效應(yīng)細(xì)胞表面CARs的簡(jiǎn)單有效方法。
為此,近日來(lái)自南加州大學(xué)Keck醫(yī)學(xué)院的研究人員開(kāi)發(fā)了一種新的基于熒光素酶的方法(研究人員稱(chēng)之為T(mén)opanga試驗(yàn))去檢測(cè)T細(xì)胞表面CARs的表達(dá)。這個(gè)方法利用了一種叫做Topanga試劑的重組融合蛋白,由CAR靶標(biāo)的胞外結(jié)構(gòu)域和海洋熒光素酶或者其衍生物組成。
這個(gè)方法涉及將表達(dá)CAR的細(xì)胞與Topanga試劑共同孵育、幾次洗滌以及熒光檢測(cè)。這個(gè)方法可以檢測(cè)基于免疫球蛋白或者非免疫球蛋白抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的CARs。
研究人員還發(fā)現(xiàn)在Topanga試劑上加上一個(gè)表位標(biāo)簽不僅可以實(shí)現(xiàn)一步純化過(guò)程,還使得這個(gè)試劑可以通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)來(lái)檢測(cè)CARs細(xì)胞。同時(shí),包含分泌的Topanga試劑的上清液可以不經(jīng)任何蛋白純化直接用于生物發(fā)光檢測(cè)或者是流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)。
基于此,研究人員認(rèn)為T(mén)opanga試驗(yàn)是一種高度敏感、高度特異性、方便、實(shí)惠而功能齊全的檢測(cè)CARs的新方法。
研究人員接下來(lái)計(jì)劃研究Topanga試驗(yàn)是否可以用于監(jiān)控CAR T細(xì)胞注射到病人體內(nèi)后的擴(kuò)增和維持。如果可以實(shí)現(xiàn),這不僅可以幫助醫(yī)生找出由于細(xì)胞擴(kuò)增太快可能出現(xiàn)中毒反應(yīng)的病人,還可以幫助病人找出由于CAR-T細(xì)胞存在時(shí)間太短導(dǎo)致可能癌癥復(fù)發(fā)的病人。
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