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      CRISPR基因激活指南
      
			
      
				2019-01-22 10:11:14
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      CRISPR-Cas9系統(tǒng)已成為眾所周知的工具，它允許研究人員編輯許多生物和細(xì)胞類型的DNA序列。然而，科學(xué)家們也越來越認(rèn)識(shí)到它可以用來激活基因的表達(dá)。為此，他們已經(jīng)構(gòu)建了許多合成基因激活Cas9蛋白來研究基因功能或補(bǔ)償潛在治療方法中基因表達(dá)不足。
      

      CRISPR基因激活指南
      

      “使用CRISPR-Cas9系統(tǒng)的各種工程化變體選擇性激活基因的可能性使得許多研究人員質(zhì)疑哪種可用的合成激活Cas9蛋白用于其目的。主要的挑戰(zhàn)是所有這些都是在不同環(huán)境中獨(dú)特設(shè)計(jì)和測(cè)試的他們的相對(duì)潛力沒有并排比較，“哈佛大學(xué)Wyss生物啟發(fā)工程研究所的核心教員，合成生物學(xué)平臺(tái)的領(lǐng)導(dǎo)者，喬治教會(huì)博士說。哈佛醫(yī)學(xué)院遺傳學(xué)教授。“我們希望提供與生物醫(yī)學(xué)研究界的并列比較。”
      

      在5月23日發(fā)表在Nature Methods上的一項(xiàng)研究中，Wyss研究小組報(bào)告了它如何嚴(yán)格比較和排列不同細(xì)胞類型中最常用的人工Cas9激活劑，包括人類，小鼠和蒼蠅。這些發(fā)現(xiàn)為研究人員提供了有價(jià)值的指導(dǎo)，使他們能夠簡(jiǎn)化他們的工作。
      

      該團(tuán)隊(duì)還包括Wyss核心學(xué)院成員James Collins博士，他還是麻省理工學(xué)院(MIT)生物工程系和Norbert Perrimon醫(yī)學(xué)工程與科學(xué)的Termeer教授和生物工程教授。 ，博士，哈佛醫(yī)學(xué)院遺傳學(xué)教授。
      

      激活Cas9蛋白的基因與來自具有眾所周知的基因激活電位的蛋白質(zhì)的可變結(jié)構(gòu)域融合，并進(jìn)行工程化以使DNA編輯能力被破壞。在一些情況下，CRISPR-Cas9系統(tǒng)的第二組分，即將復(fù)合物靶向特定DNA序列的指導(dǎo)RNA，也已經(jīng)被工程化以結(jié)合基因激活因子。
      

      “我們首先對(duì)七種先進(jìn)的Cas9激活劑進(jìn)行了調(diào)查，將它們相互比較，最初的Cas9激活劑可以為CRISPR-Cas9的基因激活潛能提供概念驗(yàn)證。其中三種基因激活比另一種更高。候選人同時(shí)保持對(duì)目標(biāo)基因的高度特異性，“Wyss研究員，該研究的共同主要作者M(jìn)arcelle Tuttle說。
      

      該團(tuán)隊(duì)接著表明，三種最佳候選者在驅(qū)動(dòng)人類，小鼠和果蠅細(xì)胞中基因表達(dá)水平最高的情況下具有可比性，無論其組織和發(fā)育起源如何。研究人員還指出了采用三種主要候選物進(jìn)一步最大化基因激活的方法。
      

      “在某些情況下，目標(biāo)基因的最大可能激活是實(shí)現(xiàn)細(xì)胞或治療效果所必需的。當(dāng)我們使用三種不同的指導(dǎo)RNA對(duì)三種拷貝的表現(xiàn)活化劑進(jìn)行靶向時(shí)，我們?cè)O(shè)法合作增強(qiáng)特定基因的表達(dá)。”亞歷杭德羅查韋斯博士，博士后研究員和該研究的共同第一作者。
      

      “CRISPR-Cas9的易用性為基因組療法的開發(fā)提供了巨大的潛力。本研究提供了有價(jià)值的新設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)，有助于合成生物學(xué)家和生物工程師在未來開發(fā)更有效的靶向基因組工程技術(shù)，”Wyss Institute Founding說。主任Donald Ingber，醫(yī)學(xué)博士，博士，哈佛醫(yī)學(xué)院血管生物學(xué)猶大民俗教授和波士頓兒童醫(yī)院血管生物學(xué)項(xiàng)目，哈佛大學(xué)生物工程學(xué)教授John A. Paulson工程學(xué)院應(yīng)用科學(xué)。
      
			

			
        
      
			
      
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