時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥２０１３年第２４卷第２期ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ?。粒危摹。停粒裕牛遥桑痢。停牛模桑茫痢。遥牛樱牛粒遥茫取。玻埃保场。郑希蹋玻础。危希病?/p>

脾陽(yáng)虛大鼠下丘腦星形膠質(zhì)細(xì)胞ＧＦＡＰ和小膠質(zhì)細(xì)胞　

０Ｘ４２的表達(dá)及大建中湯的干預(yù)作用　

王　慧，武靜，陳繼婷　

５５０００２）?。ㄙF陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，貴州貴陽(yáng)

摘要：目的觀察脾陽(yáng)虛癥大鼠下丘腦星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)的改變，以及大建中湯對(duì)脾陽(yáng)虛大鼠下丘腦星形　

膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)的影響，探討下丘腦神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞在脾陽(yáng)虛癥發(fā)病機(jī)制中的作用和大建中湯可能的作用環(huán)　

節(jié)。方法采用飲食失節(jié)傷脾氣，勞倦過(guò)度傷脾氣及苦寒瀉下傷脾陽(yáng)的方法，建立脾陽(yáng)虛模型。實(shí)驗(yàn)分為正常對(duì)照組，?！?/p>

型組，大建中湯治療組。采用免疫組織化學(xué)染法對(duì)下丘腦膠質(zhì)原纖維酸性蛋白（ＧＦＡＰ）和特異性標(biāo)記小膠質(zhì)細(xì)胞的　

０Ｘ４２抗體進(jìn)行染，觀察與內(nèi)臟活動(dòng)密切相關(guān)的下丘腦組織中星形膠質(zhì)細(xì)胞ＧＦＡＰ和小膠質(zhì)細(xì)胞０Ｘ４２表達(dá)的變化?！?/p>

結(jié)果與正常對(duì)照組相比，脾陽(yáng)虛模型組大鼠下丘腦ＧＦＡＰ與０Ｘ４２表達(dá)增強(qiáng)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)增多，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ　

＜０．０１）；大建中湯高劑量組ＧＦＡＰ與０Ｘ４２表達(dá)與模型組相比明顯下降，具有顯著性差異（Ｐ＜０．０１）。結(jié)論脾陽(yáng)虛能激　

活下丘腦星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞，膠質(zhì)細(xì)胞的激活可能是脾陽(yáng)虛癥大鼠模型形成的神經(jīng)機(jī)制之一，大建中湯可能通　

過(guò)作用于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞來(lái)達(dá)到其干預(yù)脾陽(yáng)虛癥的作用?！?/p>

關(guān)鍵詞：大建中湯；脾陽(yáng)虛；下丘腦；膠質(zhì)細(xì)胞　

Ｄ０Ｉ標(biāo)識(shí)：ｄｏｉ：１０．３９６９／ｉ．ｉｓｓｎ．１００８－０８０５．２０１３．０２．０２２　

中圖分類(lèi)號(hào)：Ｒ２８５．５　文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Ａ　文章編號(hào)：１００８－０８０５（２０１３）０２－０３０４－０２　

Ｅｆｆｅｃｔ?。铮妗。模幔辏椋幔睿瑁铮睿纭。洌澹悖铮悖簦椋铮睢。铮睢。簦瑁濉。澹穑颍澹螅螅椋铮睢。悖瑁幔睿纾澹蟆。铮妗。牵疲粒小。幔睿洹。铮兀矗病。椋睢。瑁穑铮?/p>

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ＷＡＮＧ?。龋酰?，ＷＵ?。剩椋睿纾茫龋牛危恰。剩椤簦椋睿纭?/p>

（Ｇｕｉｙａｎｇ　Ｃｏｌｌｅｇｅ?。铮妗。裕颍幔洌椋簦椋铮睿幔臁。茫瑁椋睿澹螅濉。停澹洌椋悖椋睿?，Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ｇｕｉｙａｎｇ?。担担埃埃埃玻茫瑁椋睿幔?/p>

Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ?。椋睿觯澹螅簦椋纾幔簦濉。簦瑁濉。澹穑颍澹螅螅椋铮睢。悖瑁幔睿纾澹蟆。铮妗。牵疲粒小。幔睿洹。埃兀矗病。椋睢。瑁穑铮簦瑁幔欤幔恚酰蟆。椋睢。樱穑欤澹澹睢。伲幔睿纭。模澹椋妫悖椋澹睿悖。颍幔簦?，　

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ｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄ　Ｄａｊｉａｎｚｈｏｎｇｔａｎｇ?。洌澹悖铮悖簦椋铮睿停澹簦瑁铮洌蟆。樱穑欤澹澹睢。伲幔睿纭。模澹妫椋悖椋澹睿悖。颍幔簟。恚铮洌澹臁。鳎幔蟆。澹螅簦幔猓欤椋螅瑁澹洌。遥幔簦蟆。鳎澹颍濉。洌椋觯椋洌澹洹。椋睿簦铩。悖铮睢?/p>

ｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ，Ｄａｊｉａｎｚｈｏｎｇ　ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ?。纾颍铮酰穑裕瑁濉。悖瑁幔睿纾濉。铮妗。簦瑁濉。瑁穑铮簦瑁幔欤幔恚椋恪。澹穑颍澹螅螅椋铮睢。铮妗。纾欤椋幔臁。椋妫猓颍椋欤欤幔颍。幔悖椋洌椋恪。穑颍铮簦澹椋睢?/p>

（ＧＦＡＰ）ａｎｄ　０Ｘ４２?。澹穑颍澹螅螅椋铮睢。鳎幔蟆。洌澹簦澹悖簦澹洹。猓。酰螅椋睿纭。椋恚恚酰睿铮瑁椋螅簦铮悖瑁澹恚椋悖幔臁。螅簦幔椋睿椋睿纾遥澹螅酰欤簦蟆。茫铮恚穑幔颍濉。鳎椋簦琛。悖铮睿簦颍铮臁。纾颍铮酰穑恚铮洌澹臁?/p>

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Ｄａｊｉａｎｚｈｏｎｇ　ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ?。螅瑁铮鳎澹洹。螅椋纾睿椋椋妫悖幔睿簦欤。欤铮鳎澹颉。欤澹觯澹欤螅ǎ校迹埃埃保铮妗。牵疲粒小。幔睿洹。埃兀矗病。穑铮螅椋簦椋觯濉。悖澹欤欤蟆。簦瑁幔睢。恚铮洌澹臁。纾颍铮酰稹。幔睿椋恚幔欤螅?/p>

Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ?。樱穑欤澹澹睢。伲幔睿纭。模澹椋妫悖椋澹睿悖。椋睢。簦瑁濉。颍幔簟。恚铮洌澹臁。幔悖簦椋觯幔簦澹蟆。瑁穑铮簦瑁幔欤幔恚椋恪。幔螅簦颍铮悖簦澹蟆。幔睿洹。恚椋悖颍铮纾欤椋幔唬帷。模幔辏椋幔睿瑁铮睿纭。洌澹悖铮悖簦椋铮睢。瑁幔蟆?/p>

ａ　ｃｏｕｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ?。澹妫妫澹悖簟。猓。颍澹洌酰悖椋睿纭。瑁穑铮簦瑁幔欤幔恚椋恪。牵疲粒小。幔睿洹。埃兀矗病。澹穑颍澹螅螅椋铮睿?/p>

Ｋｅｙ?。鳎铮颍洌螅海模幔辏椋幔睿瑁铮睿纭。洌澹悖铮悖簦椋铮?；?。樱穑欤澹澹睿伲幔睿纭。模澹椋妫悖椋澹睿悖?；Ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｕｓ；?。牵欤椋帷。悖澹欤臁?/p>

脾陽(yáng)虛是指脾陽(yáng)虛衰、失于溫運(yùn)、陰寒內(nèi)生所表現(xiàn)的虛寒癥　陽(yáng)虛證發(fā)病中的作用，探討大建中湯可能的作用環(huán)節(jié)?！?/p>

候，由于脾主運(yùn)化異常，導(dǎo)致相關(guān)消化系統(tǒng)功能紊亂，進(jìn)而出現(xiàn)消?。辈牧吓c儀器　

化不良癥狀的病理狀態(tài)。臨床表現(xiàn)為畏寒、肢冷、乏力、消瘦、腹　１．１動(dòng)物及分組健康成年清潔級(jí)ＳＤ雄性大鼠２８只，體質(zhì)量　

許可證號(hào)ＳＣＸＫ　

痛、便溏及腹瀉等。大建中湯出自《金匱要略》，是臨床治療脾胃　

２００～２２０ｇ（由重慶騰鑫生物技術(shù)有限公司提供，

２００７—０００８。置于安靜，溫度保持恒定（２２±２）℃，避免強(qiáng)　

虛寒癥的常用方劑，臨床療效確切。目前對(duì)脾陽(yáng)虛癥的研究較多　

（渝）

集中在能量代謝、胃腸功能活動(dòng)、血液中有關(guān)化學(xué)物質(zhì)改變等方　光的環(huán)境中飼養(yǎng)３?。洹ｋS機(jī)分為①正常對(duì)照組；②模型組；③大建　

按灌胃劑量分為兩個(gè)劑量組，即大劑量組、小劑量　

面，脾陽(yáng)虛癥對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)作用的研究較少。下丘腦是對(duì)各種內(nèi)臟　

中湯治療組：

功能進(jìn)行整合的較高級(jí)中樞，脾陽(yáng)虛是否能影響下丘腦的神經(jīng)活　

組，以上每組７只。

ｙｍｐｕｓ，Ｊａｐａｎ），ＧＦＡＰ　

動(dòng)非常值得探討。神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞是組成神經(jīng)系統(tǒng)數(shù)量最多的一　

１．２器材、試劑與藥物ＢＸ一４１顯微鏡（Ｏｌ

ｎｇ?。耍铮睿纾椒狻?/p>

種細(xì)胞，研究表明神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞激活后可釋放多種化學(xué)物質(zhì)，參　

（北京博奧森有限公司），０Ｘ４２（ａｂｃａｍ，Ｈｏ

ＰＶ一６００２），　

與多種復(fù)雜的神經(jīng)系統(tǒng)功能…。本研究擬復(fù)制脾陽(yáng)虛大鼠模　

疫組化試劑盒（北京中杉金橋公司產(chǎn)，ＰＶ一６００１、

型，觀察與內(nèi)臟活動(dòng)密切相關(guān)的下丘腦組織中星形膠質(zhì)細(xì)胞　

ＤＡＢ顯劑（北京博奧森有限公司）。中藥材均購(gòu)自貴陽(yáng)同濟(jì)堂　

經(jīng)貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院方藥教研室汪毅教授鑒定為正品。造?！?/p>

ＧＦＡＰ和小膠質(zhì)細(xì)胞０Ｘ４２的表達(dá)變化，探討神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞在脾　

大藥店，

用番瀉葉水浸液制備：將番瀉葉按１：１比例與水混合，于恒溫水　

浴箱中７０％浸泡２４?。瑁瑢⒔靡河茫硨蛹啿歼^(guò)濾后在４℃冰箱中　

收稿日期：２０１２?。保埃玻?；修訂日期：２０１２－１１－２６　

保存?zhèn)溆?。治療用藥大建中湯的制備：蜀椒（炒去汗）：干姜：?/p>

基金項(xiàng)目：貴州省自然科學(xué)基金資助（黔科合Ｊ字［２０１０］２１９２號(hào)）　

人參：飴糖（烊化）＝１：２：１：５，制備方法參照文獻(xiàn)　，分別制　

作者簡(jiǎn)介：王慧（１９６７一），女（漢族），貴州貴陽(yáng)人，現(xiàn)任貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院基　

成大劑量（含生藥１．５ｇ／ｍ１）、小劑量（含生藥０．３７５ｇ／ｍ１）兩種濃　

礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院副教授，博士學(xué)位，主要從事中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)研究工作．　

通訊作者簡(jiǎn)介：陳繼婷（１９５２一），女（漢族），江蘇南京人，現(xiàn)任貴陽(yáng)中醫(yī)　

度水煎液。

學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院教授，碩士學(xué)位，主要從事《金匱要略》方證的實(shí)驗(yàn)和臨床　

２方法　

２．１　造模根據(jù)我們以往實(shí)驗(yàn)的造模方法加以改進(jìn)，造模過(guò)程分　

應(yīng)用研究工作．　

．３０４?