酒泉地區(qū)嬰幼兒腹瀉輪狀病毒感染及其型別的研究
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酒泉地區(qū)嬰幼兒腹瀉輪狀病毒感染及其型別的研究
摘要目的:通過分子流行病學(xué)調(diào)查,研究酒泉地區(qū)嬰幼兒輪狀病毒(RV)腹
瀉的分型特點。方法:采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)和逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)
(RT-PCR),對2001年11月~2002年12月酒泉地區(qū)收集的324例嬰幼兒腹瀉糞
便標(biāo)本中的204份進行輪狀病毒病原檢測,并對陽性標(biāo)本進行分型。結(jié)果:ELISA
法RV陽性率為54.9%,陽性率與性別無關(guān)。不同年齡段的感染率以7~18個月
年齡段最高,但各年齡段間差異無顯著性意義。不同月份的感染率差異具有顯著
性意義,發(fā)病高峰在2001年11、12月份和2002年10、11月份。在ELISA陽
性標(biāo)本中RT-PCR法檢出G3者50例,G1者16例、G2者6例,G9者2例,
G3與G1混合感染6例,G3與G2混合感染2例,30例未能分型。G分型陽性
標(biāo)本中檢出P[8]型24例,P[4]型14例,未發(fā)現(xiàn)P[6]、P[9]、P[10]。結(jié)論:輪狀
病毒是酒泉地區(qū)嬰幼兒非細(xì)菌性腹瀉的主要病原,其流行的主要血清型為G3型
及G1型。本次研究結(jié)果從分子水平初步揭示了酒泉地區(qū)輪狀病毒的流行情況,
為輪狀病毒疫苗在該地區(qū)的應(yīng)用提供了流行病學(xué)資料。
關(guān)鍵詞腹瀉嬰幼兒輪狀病毒分子流行病學(xué)基因型
資料和方法
2001年11月~2002年12月共采集酒泉市人民醫(yī)院兒科門診和住院部嬰幼
兒腹瀉糞便標(biāo)本324例,置-70℃保存?zhèn)溆?。采用SPSS11.0軟件隨機抽樣選取
204例標(biāo)本進行檢測。
用ELISA法檢測RV抗原,采用IDEIATMRotavirus試劑盒,購自英國
DakoCytomationLtd,按說明書操作。
用RT-PCR法對RV病毒株進行血清株與基因型的鑒定,TaqDNA聚合酶和
AMV逆轉(zhuǎn)錄酶購自美國PromegaCorporation;RNA酶抑制劑(RNasin)購自寶生
物工程(大連)有限公司;TRIZOL購自MolecularResearchCenterInc.;dNTPs購
自sbs賽百盛公司;DNAMakerDL2,000購自寶生物工程(大連)有限公司。采用
PTC-100TMPCR儀(美國MJRESEARCH公司)進行PCR反應(yīng)。用TRIZOL提取
RV核酸。先逆轉(zhuǎn)錄合成病毒cDNA,后巢式PCR對RV標(biāo)本進行分型,方法見
文獻[1]。
每批分別用已測序證實的糞便標(biāo)本作為陽性和陰性對照。
統(tǒng)計學(xué)方法:采用SPSS11.0進行統(tǒng)計,計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,兩
組比較采用非配對t檢驗,計數(shù)資料采用X2檢驗。
結(jié)果
RV腹瀉的年齡分布:本研究共采集酒泉市人民醫(yī)院就診嬰幼兒腹瀉糞便標(biāo)
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