清除豬的異種移植障礙檢測(cè)傳染因子
移植器官短缺 - 包括腎臟和心臟 - 意味著許多患者在等待名單時(shí)死亡。因此,阿拉巴馬大學(xué)伯明翰分校和其他地方的研究已經(jīng)轉(zhuǎn)向豬器官作為替代品。
利用基因編輯,研究人員修改了這些器官以防止排斥反應(yīng),而對(duì)靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物的研究表明,改良的豬器官具有良好的耐受性。
需要增加一個(gè)步驟,以確保這些種間移植的安全性 - 對(duì)供體豬中的病毒和其他傳染性微生物進(jìn)行敏感的定量分析,這些分析可能在移植過(guò)程中獲得對(duì)人類(lèi)的接觸。
美國(guó)食品和藥物管理局要求在植入之前對(duì)用于從動(dòng)物到人類(lèi)的異種移植的組織進(jìn)行這樣的測(cè)試。移植組織中的感染因子可能成為人類(lèi)新出現(xiàn)的傳染病,但這種可能性很小。
在Xenotransplantation發(fā)表的一篇論文中,阿拉巴馬大學(xué)伯明翰分校的Mark Prichard博士及其同事描述了30種豬傳染因子定量檢測(cè)方法的開(kāi)發(fā)和測(cè)試。這些測(cè)定具有類(lèi)似于人類(lèi)患者的病毒載量的臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)定的靈敏度。驗(yàn)證后,UAB團(tuán)隊(duì)還對(duì)通過(guò)剖腹產(chǎn)從母豬分娩的9頭母豬和22頭仔豬進(jìn)行了分析。
“向前邁進(jìn),確保這些器官的安全至關(guān)重要,”普里查德說(shuō)。“使用高度敏感的技術(shù)檢測(cè)潛在的病原體將有助于減少異種移植中的不良事件。”
“這些分析有望作為篩查計(jì)劃的一部分,用于鑒定合適的供體動(dòng)物,驗(yàn)證和釋放用于研究目的的可移植器官,并監(jiān)測(cè)移植受體,”UAB兒科學(xué)系教授兼兒科系主任Prichard說(shuō)。分子診斷實(shí)驗(yàn)室。
UAB研究人員開(kāi)發(fā)了定量聚合酶鏈反應(yīng)或qPCR,可檢測(cè)豬和兩組支原體中常見(jiàn)的28種病毒。他們建立了每種測(cè)定的重現(xiàn)性,靈敏度,特異性和檢測(cè)下限。除三個(gè)外,其余均顯示出良好定量分析的特征,檢測(cè)值的下限范圍為1至16個(gè)病毒或細(xì)菌遺傳物質(zhì)。
此外,豬病毒檢測(cè)沒(méi)有給一些密切相關(guān)的人類(lèi)病毒帶來(lái)假陽(yáng)性。
作為開(kāi)始了解正常健康動(dòng)物的傳染病負(fù)荷并確保異種移植研究中使用的豬組織的安全性,研究人員隨后篩選了9只成年母豬的血液,鼻拭子和糞便樣本以及22只通過(guò)剖腹產(chǎn)分娩的仔豬。
支原體物種和兩種不同的皰疹病毒是最常檢測(cè)到的微生物。然而,從感染了任一種或兩種皰疹病毒的三頭母豬分娩的14頭仔豬未感染皰疹病毒,表明這些病毒從母豬傳播到剖腹產(chǎn)仔豬是低效的。
Prichard說(shuō),這些分析有望提高異種移植豬組織的安全性,并且還有助于異種移植后人體標(biāo)本的評(píng)估。
UAB的研究人員說(shuō),他們隨后評(píng)估了300多個(gè)額外的標(biāo)本,這導(dǎo)致了大多數(shù)目標(biāo)的檢測(cè)。“在豬標(biāo)本中檢測(cè)到這些目標(biāo),可以確保分析方法按設(shè)計(jì)運(yùn)行,”Prichard說(shuō),“并且沒(méi)有先驗(yàn)原因,某些目標(biāo)可能比其他人使用此處描述的方法更難以發(fā)現(xiàn)。”
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