·926·???????????????????????????????國際中醫(yī)中藥雜志2016年10月第38卷第10期IntJTradChinMed,October2016,Vol.38,No.10?

·論著·

金銀花與山銀花主要有效成分含量比較

饒偉文黃海燕

【摘要】目的通過測定金銀花和山銀花主要有效成分含量，比較兩者的質量。方法按2015年

版《中華人民共和國藥典》金銀花和山銀花項下收載的含量測定方法，對50批不同產地金銀花、山銀花

中綠原酸、木犀草苷、灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷乙含量進行測定。結果金銀花木犀草苷含量較

高，綠原酸含量較低，不含或少含皂苷類成分。山銀花的主要基源灰氈毛忍冬、紅腺忍冬的綠原酸、總

皂苷含量較高，少含或不含木犀草苷。結論金銀花與山銀花的主要成分含量各有特，部分金銀花樣

品中皂苷含量較高，用作注射劑原料時，應做皂苷限量檢查。

【關鍵詞】金銀花；山銀花；有效成分；含量測定；質量控制

ComparativeanalysesofthemainactiveingredientsofLoniceraejaponicaeflosand

LoniceraeflosRaoWeiwen,InstitutesforFoodandDrugControl,Guilin541001,

China

Correspondingauthor:RaoWeiwen,Email:glyjs_raoww@

【Abstract】ObjectiveTocomparethequalityofLoniceraeflosandLoniceraejaponicaeflosby

sAccordingtomethodsandstandardsofdeterminationin

ChinesePharmacopoeia(2015Edition),thecontentofchlorogenicacid,galuteolin,macranthoidinBand

raeflosweredetermined.

ResultsForLoniceraejaponicaeflos(LonicerajaponicaThunb.),thecontentsofgaluteolinwashigher,and

chlorogenicacidwaslower,mainspeciesofLoniceraeflos(Lonicera

macranthoidesHand.-icerahypoglaucaMiq.),thecontentsofchlorogenicacidandthesumof

saponinswerehigher,siThemainactiveingredientsofLoniceraejaponicae

tentsofsaponinsinsomesamplesofLoniceraejaponicaeflos

werehigher,sothetestofsaponinshouldbecideredwhenitsrawmaterialforinjection.

【Keywords】Flosloniceraejaponicae;Floslonicerae;Mainactiveingredients;Determination;Quality

control

金銀花是傳統(tǒng)常用中藥，來源于忍冬科植物

忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花蕾或帶初

開的花。1977－2000年前后5版《中華人民共和

國藥典》(以下簡稱《中國藥典》)收載的金銀花，

其來源包括忍冬科植物忍冬Lonicerajaponica

Thunb.、紅腺忍冬LonicerahypoglaucaMiq.、山銀

花LoniceraconfusaDC.和毛花柱忍冬Lonicera

dasystylaRhed.。2005年版《中國藥典》將其分列

DOI:10.3760/.1673-4246.2016.10.017?

作者單位：541002廣西壯族自治區(qū)桂林食品藥品檢驗所

通信作者：饒偉文，Email:glyjs_raoww@

為金銀花和山銀花2個品種，金銀花的來源為忍

冬，山銀花的來源為忍冬科灰氈毛忍冬Lonicera

macranthoidesHand.-Mazz.、紅腺忍冬Lonicera

hypoglaucaMiq.、華南忍冬LoniceraconfusaDC.

和黃褐毛忍冬LonicerafulvotomentosaHsuet

。但兩者性味歸經、功效、主治、用法

用量相似1，臨床應用較為混亂。[]

目前，有關金銀花與山銀花所含主要成分的

含量比較研究已有報道，但對兩者化學成分系統(tǒng)

對比分析的數據尚不多2-4。為進一步比較金銀花[]

和山銀花的質量，本研究按照2015年版《中國藥

萬方數據

國際中醫(yī)中藥雜志2016年10月第38卷第10期IntJTradChinMed,October2016,Vol.38,No.10??????????????????????????????·927·?

典》金銀花、山銀花項下收載的含量測定方法，

對50批不同產地金銀花、山銀花中綠原酸、木犀

草苷、灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷乙含量進

行對比，為指導其臨床合理應用提供參考。

1儀器與試藥

1.1試驗儀器

Waters2695/2998/2487液相譜儀(美國

Waters公司)；Alltech3300ELSD檢測器(美國奧

泰公司)；KQ-600E型超聲儀(昆山市超聲儀器有

限公司)；SIGMA3-30K高速臺式冷凍離心機

(SIGMA-ALDRICH)；LabTechEV311旋轉蒸發(fā)

儀(北京萊伯泰科儀器股份有限公司)。

1.2試驗試劑

灰氈毛忍冬皂苷乙對照品(批號111814-

201303，含量92.8%)、川續(xù)斷皂苷乙對照品(批號

111813-201202，含量93.4%)木犀草苷對照品(批

號111720-201307，含量99.3%)、綠原酸對照品(批

號110753-201314，含量96.6%)均購于中國食品藥

品檢定研究院；乙腈、甲酸、冰醋酸為譜純，

其余試劑均為分析純，水為高純水。

1.3樣品

金銀花19批、山銀花31批(包括灰氈毛忍冬

12批、紅腺忍冬15批、黃褐毛忍冬3批和華南忍

冬1批)，均系本所采集或收集，并由饒偉文主任

藥師鑒定金銀花為忍冬科植物忍冬Lonicera

japonicaThunb.的干燥花蕾或帶初開的花；山銀花

為同屬植物灰氈毛忍冬Loniceramacranthoides

Hand.-Mazz.、紅腺忍冬LonicerahypoglaucaMiq.、

黃褐毛忍冬LonicerafulvotomentosaHsuet

和華南忍冬LoniceraconfusaDC.的干

燥花蕾或帶初開的花。

2方法與結果

2.1木犀草苷的含量測定

2.1.1譜條件：按2015年版《中國藥典》金銀

萬方數據

花項下木犀草苷含量測定方法[1]進行。譜柱為

AgilentZORBAXSB-pheny(4.6mm×250mm，

5μm)；流動相為乙腈(A)-0.5%冰乙酸(B)，梯度

洗脫，洗脫程序見表1；流速為1.0ml/min；檢測

波長為350nm。理論塔板數按木犀草苷峰計算不

低于20000，與其他譜峰分離度大于1.5。譜

圖見圖1。

表1流動相梯度洗脫表(%)

時間乙腈0.1%乙酸

0～15min10～2090～80

15～30min2080

30～40min20～3080～70

A

1

010203040

B

1

010203040

t/min

注A：木犀草苷對照品溶液；B：供試品溶液；1：木犀草苷

圖1木犀草苷的HPLC圖

2.1.2溶液配制：①對照品溶液的配制：精密稱

取木犀草苷對照品10.21mg，置于50ml容量瓶

中，用70%乙醇溶解并稀釋至刻度，得對照品母

液（202.77μg/ml），再取2ml至10ml容量瓶中，

用70%乙醇溶解并稀釋至刻度，制成40.55μg/ml

的對照品溶液。②供試品溶液的配制：取金銀花

或山銀花細粉(過4號篩)約2.00g，精密稱定，置

具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇50ml，稱定重

量，超聲處理(功率250W，頻率35kHz)1h，放

冷，再稱定重量，用70%乙醇補足減失的重量，

搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液10ml，回收溶劑至

干，殘渣用70%乙醇溶解并轉移至5ml量瓶中，

加70%乙醇至刻度，即得。

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2.1.3線性關系考察：分別吸取1、2、3、5、10ml

的202.77μg/ml木犀草苷對照品溶液置于10ml

容量瓶中，以70%乙醇定容至刻度，得到濃度分

別為20.28、40.55、60.83、101.39、202.77μg/ml

的木犀草苷對照品溶液。精密吸取對照品溶液10μl，

分別注入液相譜儀中，按上述譜條件測定峰

面積。以測得峰面積為縱坐標(A)，對照品進樣量

為橫坐標(C)繪制標準曲線，得木犀草苷回歸方

程：A＝1.8874C＋105.77，R＝0.9995，表明木犀

草苷進樣濃度在20.28～202.77μg/ml范圍內與峰

面積呈良好線性關系。

2.1.4精密度考察：取木犀草苷對照品溶液

(40.55μg/ml)連續(xù)進樣5次，結果木犀草苷峰面積

的RSD＝0.24%(n＝5)，表明儀器精密度良好。

2.1.5穩(wěn)定性試驗：取供試品溶液1份，分別于0、

2、6、12、24h測定，

記錄峰面積，計算RSD＝0.33%

(n＝5)，表明供試品溶液在24h內穩(wěn)定性良好。

2.1.6重復性試驗：取同一批金銀花樣品粉末6份，

按上述方法測定，計算木犀草苷平均含量為0.052%，

RSD＝1.28%(n＝6)，表明本方法重復性良好。

2.1.7加樣回收率試驗：在已測定木犀草苷含量

的金銀花樣品中定量加入木犀草苷對照品，測定

9次，平均回收率為103.10%，RSD＝2.27%。

2.1.8樣品測定結果：精密吸取對照品溶液

(40.55μg/ml)、供試品溶液各10μl，注入液相

譜儀，以外標法計算樣品中木犀草苷含量。結果

見表2、表3。

2.2綠原酸、灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷乙

的含量測定

2.2.1譜條件：按2015年版《中國藥典》山銀

花項下灰氈毛忍冬皂苷乙、川續(xù)斷皂苷乙含量測

定方法[1]進行。譜柱為PhenomenexGemini

C18(4.6mm×250mm，5μm)；柱溫30℃；ELSD

檢測器漂移管溫度：60℃，氣體流量2.0ml/min。

理論塔板數按綠原酸峰計算不低于20000，綠原

酸、灰氈毛忍冬皂苷乙、川續(xù)斷皂苷乙與其他

萬方數據

譜峰分離度均大于1.5。譜圖見圖2。

A

1

2

3

0102030

B

2

1

3

0102030

t/min

注A：混合對照品溶液；B：供試品溶液；1：綠原酸；2：灰氈毛忍

冬皂苷乙；3：川續(xù)斷皂苷乙

圖2綠原酸、灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷乙的HPLC圖

2.2.2溶液制備：①對照品溶液的配制：精密稱

取綠原酸對照品21.12mg、灰氈毛忍冬皂苷乙對

照品21.72mg和川續(xù)斷皂苷乙對照品20.63mg置

于20ml的量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖

勻，作為儲備液。再用甲醇逐步稀釋至以下所需

要的濃度：綠原酸50.00、102.01、204.02、408.04、

816.08μg/ml；灰氈毛忍冬皂苷乙50.39、100.78、

201.56、503.90、1007.81μg/ml；川續(xù)斷皂苷乙

9.63、19.27、96.34、192.68、385.37μg/ml的溶液，

即得。②供試品溶液的配制：取金銀花或山銀花

粉末(過四號篩)，取約0.30g，精密稱定，置50ml

離心管中，加50%甲醇40ml并混勻，超聲處理

40min(功率250W，頻率35kHz)，5000r/min離

心10min，取上清液轉移至50ml量瓶中，離心管

中殘渣再加50%甲醇7ml渦旋1min，5000r/min

離心10min，合并上清液至同一量瓶中，加50%

甲醇至刻度，混勻，即得。

2.2.3線性關系考察：稱取綠原酸對照品22.06mg，

置20ml容量瓶，用甲醇溶解并稀釋至刻度，并稀

釋至濃度分別為0.53、

1.07、5.33、10.65、53.27、

106.55、1065.50μg/ml的溶液；精密稱取灰氈毛

忍冬皂苷乙對照品21.54mg，置10ml容量瓶，甲

醇溶解并稀釋至刻度，并稀釋至濃度分別為5.00、

國際中醫(yī)中藥雜志2016年10月第38卷第10期IntJTradChinMed,October2016,Vol.38,No.10??????????????????????????????·929·?

9.99、49.97、99.95、499.73、999.46、1998.91μg/ml

的溶液；精密稱取川續(xù)斷皂苷乙21.20mg，置20ml

容量瓶中，甲醇溶解并稀釋至刻度，并稀釋至濃

度分別為4.95、9.90、49.50、99.00、198.01、495.02、

990.04μg/ml的溶液。精密吸取上述各對照品溶液

10μl，按上述譜條件測定峰面積。以峰面積為

縱坐標(A)，對照品進樣量為橫坐標(C)繪制標準曲

線，得綠原酸logA＝1.2976×logC＋2.6197，R＝

0.9995，灰氈毛忍冬皂苷乙logA＝1.2753×logC＋

2.8162，R＝0.9995，川續(xù)斷皂苷乙logA＝1.2818×

logC＋2.8366，R＝0.9997；表明綠原酸進樣濃度

在0.53～1065.50μg/ml范圍、灰氈毛忍冬皂苷乙

在5.00～1998.91μ

g/ml范圍、川續(xù)斷皂苷乙在

4.95～990.04μg/ml范圍內呈良好線性關系。

2.2.4精密度考察：取濃度約為200μg/ml的對照品

溶液，連續(xù)進樣5次，計算綠原酸峰面積的RSD＝

0.35%(n＝5)，灰氈毛忍冬皂苷乙峰面積的RSD＝

0.90%(n＝5)，川續(xù)斷皂苷乙峰面積的RSD＝

1.28%(n＝5)，表明儀器精密度良好。

2.2.5穩(wěn)定性試驗：取供試品溶液1份，分別于0、

2、6、12、24h測定，記錄峰面積，結果綠原酸

峰面積的RSD＝0.52%(n＝5)，灰氈毛忍冬皂苷乙

峰面積的RSD＝0.61%(n＝5)，川續(xù)斷皂苷乙峰面

積的RSD＝0.99%(n＝5)，表明供試品溶液在24h

內穩(wěn)定性良好。

2.2.6重復性試驗：稱取同一批樣品粉末6份，按上

述方法測定，計算綠原酸平均含量為5.42%，

RSD＝

0.62%(n＝6)，灰氈毛忍冬皂苷乙平均含量7.65%，

RSD＝0.93%(n＝6)，川續(xù)斷皂苷乙平均含量為

0.86%，RSD＝0.97%(n＝6)，表明重復性良好。

2.2.7加樣回收率試驗：在已測定含量的山銀花

樣品中加入定量對照品，測定5次，綠原酸平均

回收率為93.65%，RSD＝0.72%；灰氈毛忍冬皂苷

乙平均回收率為100.78%，RSD＝2.63%；川續(xù)斷

皂苷乙平均回收率為102.24%，RSD＝1.34%。

2.2.8樣品測定結果：精密吸取“2.2.2”項下配

制的5種濃度對照品溶液、供試品溶液各10μl，

注入液相譜儀，以外標曲線法對數方程計算樣

品中綠原酸、灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷乙

的含量。見表2、表3。

表219批金銀花含量測定結果(%)

基源來源/產地灰氈毛忍冬皂苷乙川續(xù)斷皂苷乙皂苷總量木犀草苷綠原酸

忍冬桂林普蘭德生物科技有限公司/恭城縣栽培00.240.240.0713.08

云南鴻翔中藥科技有限公司/山東0000.0593.52

玉林中藥材市場/山東00.090.090.0633.52

玉林中藥材市場/山東0.430.080.510.0572.85

河北安國藥材市場/河北0000.0423.03

康美藥業(yè)股份有限公司/河南0000.0533.61

玉林祥生中藥飲片公司/不詳2.020.192.210.0443.54

自采/廣西桂林市郊區(qū)01.301.300.0100.06

河北安國藥材市場/河南0000.0672.92

自采/廣西桂林市郊區(qū)00.920.920.0312.63

湖南馨恒堂中藥科技有限公司/山東0000.0332.91

亳州市京皖中藥飲片廠/河南0000.0493.14

安徽神州中藥飲片有限公司/河南0000.0582.58

成都康美藥業(yè)有限公司/河南0000.0463.25

成都康美藥業(yè)有限公司/河南0000.0353.16

康美藥業(yè)股份有限公司/河南0000.0423.10

自采/北京市順義區(qū)0000.0291.08

玉林中藥材市場/山東0000.0522.72

玉林中藥材市場/山東1.090.271.200.0191.17

萬方數據

·930·???????????????????????????????國際中醫(yī)中藥雜志2016年10月第38卷第10期IntJTradChinMed,October2016,Vol.38,No.10?

表331批山銀花含量測定結果(%)

基源

紅腺忍冬

華南忍冬

來源/產地灰氈毛忍冬皂苷乙川續(xù)斷皂苷乙皂苷總量木犀草苷綠原酸

灰氈毛忍冬自采/廣西南丹縣芒場鎮(zhèn)8.290.568.850.0051.86

湖南高橋藥材市場/湖南6.040.436.470.0105.18

四川成都荷花池藥材市場8.941.1110.050.0104.47

湖南邵陽市隆回縣7.310.878.180.0136.44

貴州遵義洪關6.600.597.190.0224.97

浙江永嘉縣橋下鎮(zhèn)7.140.607.740.0145.73

南寧市乾瑞生態(tài)農業(yè)合作社/廣西南丹7.070.557.620.0165.30

重慶武隆縣巷口鎮(zhèn)6.850.467.310.0134.32

廣西資源縣梅溪鄉(xiāng)6.630.897.520.0075.10

玉林中藥材市場/湖南6.190.676.860.0154.14

玉林中藥材市場/廣西5.210.605.810.0174.02

安徽井泉集團中藥飲片有限公司/廣西4.750.405.1503.02

廣西忻城縣北更鄉(xiāng)2.623.516.130.0074.86

廣西忻城縣1.872.194.060.0044.91

廣西馬山縣古寨鄉(xiāng)2.953.076.020.0026.43

廣西馬山縣2.222.654.870.0014.98

浙江永嘉縣橋下鎮(zhèn)04.504.500.0012.10

浙江樂清東亞石斛有限公司03.533.530.0091.71

浙江樂清縣雁蕩山03.823.820.0152.74

河北安國中藥材市場04.454.450.0012.17

安徽亳州中藥材市場2.873.806.670.0023.84

廣西都安縣1.952.704.6502.85

廣西都安縣3.155.578.7202.81

廣西忻城縣2.183.385.5605.15

廣西忻城縣北更鄉(xiāng)5.990.346.330.0015.15

廣西忻城縣6.400.366.760.0015.75

廣西忻城縣北更鄉(xiāng)3.250.824.070.0023.34

玉林中藥材市場/貴州0.098.528.610.0130.75

4.794.920.0130.60玉林中藥材市場/貴州0.13

黃褐毛忍冬廣西百市隆林縣椏杈鎮(zhèn)0.102.983.080.0160.92

廣西藥用植物園0.3000.300.0041.19

3討論

3.1木犀草苷含量情況

19批金銀花樣品均含木犀草苷，平均含量為

0.045%，其中僅有8批符合《中國藥典》規(guī)定的

不得少于0.050%；山銀花4個基源共31批樣品中，

有27批含木犀草苷，但含量均低于0.050%。木犀

草苷平均含量高低順序為金銀花＞黃褐毛忍冬＞

灰氈毛忍冬＞紅腺忍冬＞華南忍冬。

3.2總皂苷含量情況

19批金銀花中，僅7批含川續(xù)斷皂苷乙，其

中3批含灰氈毛忍冬皂苷乙，總皂苷含量較低，

在0.09%～2.21%范圍；12批灰氈毛忍冬均含2種

皂苷成分，總皂苷平均含量為7.40%；15批紅腺

忍冬均含皂苷成分，但有4批不含灰氈毛忍冬皂

苷乙，總皂苷含量平均為5.34%；3批黃褐毛忍冬

中總皂苷含量平均為5.54%；華南忍冬含總皂苷

0.30%?？傇碥掌骄扛叩晚樞驗椋夯覛置潭?/p>

黃褐毛忍冬＞紅腺忍冬＞華南忍冬＞金銀花。

3.3綠原酸含量情況

19批金銀花中綠原酸含量平均為2.72%，有

15批符合《中國藥典》規(guī)定(不得少于1.50%)；

12批灰氈毛忍冬中綠原酸含量平均為4.55%，其

萬方數據

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中11批符合《中國藥典》規(guī)定(不得少于2.00%)；

15批紅腺忍冬中綠原酸含量平均為3.92%，其中

14批符合《中國藥典》規(guī)定；3批黃褐毛忍冬中綠

原酸含量平均為0.76%，1批華南忍冬綠原酸含量

為1.19%，均不符合《中國藥典》規(guī)定。綠原酸平

均含量由高到低依次為：灰氈毛忍冬＞紅腺忍冬＞

金銀花＞華南忍冬＞黃褐毛忍冬。

總體上看，金銀花木犀草苷含量較高，綠原

酸含量較低，不含或少含皂苷類成分；相比之下，

灰氈毛忍冬和紅腺忍冬含綠原酸和總皂苷較高，

少含或不含木犀草苷。從測定50批樣品的結果看，

不同樣品中主要成分的有無及含量高低不僅與植

物品種、基源有關，也與產地、加工方法有關。

因此，根據木犀草苷或皂苷成分的有無判定是金

銀花或山銀花是不可靠的。

3.4關于金銀花與山銀花質量的綜合評價問題

金銀花與山銀花均為忍冬屬植物的花，主要

含有機酸類(綠原酸、咖啡酸等)、黃酮類(木犀草

苷等)、皂苷類(灰氈毛忍冬皂苷乙和川續(xù)斷皂苷

乙等)、揮發(fā)油類成分。木犀草苷具有較強的殺菌

消炎，解熱鎮(zhèn)痛的功效[5]；綠原酸具有抗氧化、抗

腫瘤、抗菌、抗病毒、免疫調節(jié)、降糖等多種作

用[6]；川續(xù)斷皂苷乙對革蘭陽性金黃葡萄球菌、

表皮葡萄球菌和革蘭陰性綠膿桿菌、大腸桿菌、

陰溝腸桿菌、肺炎克雷伯菌均具有抗菌活性[7]；灰

氈毛忍冬皂苷乙有保肝、抗腫瘤及免疫調節(jié)作用

等；揮發(fā)油有抗菌、抗炎、解熱、止咳等作用。

這些成分的藥理作用大體上與金銀花、山銀花的

清熱解毒、疏散風熱功能相關。因此，目前主要

以這些成分的含量作為質量評價指標。由于中藥

普遍存在多組分共存、多種藥理作用綜合起效的

情況，僅依據其中某一種成分的含量高低判定其

質量優(yōu)劣顯然不科學。因此，我們既不能因金銀

花中木犀草苷含量比山銀花高就認為其質量更

好，也不能因山銀花綠原酸和皂苷含量高就認為

其質量更優(yōu)。而是應根據各成分的藥理作用特點

萬方數據

和臨床用藥目的進行綜合評價。據報道，灰氈毛

忍冬和忍冬的有效成分含量存在較大差異，但均

有明顯地抑菌殺菌作用，且在抗菌、抗炎、解熱、

免疫調節(jié)等方面，灰氈毛忍冬與忍冬作用相當[8]。

3.5關于山銀花品種問題的建議

2015年版《中國藥典》收載的山銀花包括灰

氈毛忍冬、紅腺忍冬、黃褐毛忍冬、華南忍冬4個

基源。經調查研究發(fā)現，目前山銀花的主要基源

是灰氈毛忍冬，紅腺忍冬次之；黃褐毛忍冬僅在

貴州和廣西隆林縣有產，華南忍冬已無商品供應，

野外采集標本都不易找到。含量測定結果表明這

2個基源的幾種成分含量都偏低，不符合藥典規(guī)

定。建議今后不再收載黃褐毛忍冬和華南忍冬。

3.6關于金銀花與山銀花區(qū)別使用的建議

根據現有的研究結果，金銀花與山銀花的成

分各有特。鑒于山銀花總皂苷含量較高，金銀

花只有少數批次含皂苷。建議中成藥注射劑應使

用金銀花，且在投料前應先做皂苷限量檢查，以

免產生安全風險。對于湯劑配方、口服或外用的

中成藥，金銀花與山銀花均可通用。

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(收稿日期：2016-02-26)

(本文編輯：張琪)